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PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物的管理登記制度
在現(xiàn)實(shí)社會(huì)中,很多情況下我們都會(huì)接觸到制度,制度一般指要求大家共同遵守的辦事規(guī)程或行動(dòng)準(zhǔn)則,也指在一定歷史條件下形成的法令、禮俗等規(guī)范或一定的規(guī)格。你所接觸過(guò)的制度都是什么樣子的呢?以下是小編幫大家整理的PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物的管理登記制度,僅供參考,希望能夠幫助到大家。
PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物的管理登記制度1
PCR實(shí)驗(yàn)室管理制度
1、本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行臨床基因擴(kuò)增檢測(cè)及相關(guān)檢驗(yàn)工作,不得進(jìn)行其他實(shí)驗(yàn)操作。
2、本實(shí)驗(yàn)室采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)作為臨床基因診斷的主要手段,實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū):試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)(第一區(qū))、標(biāo)本處理區(qū)(第二區(qū))、擴(kuò)增區(qū)(第三區(qū))、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)(第四區(qū))。每一工作區(qū)配備專用的設(shè)備、儀器、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公用品、專用工作服,并有明顯的區(qū)分標(biāo)識(shí),專用工作服。標(biāo)本的接收則在標(biāo)本接收處進(jìn)行。
3、各工作區(qū)專用的儀器設(shè)備、辦公用品、工作服、實(shí)驗(yàn)耗材和清潔用具等,不可混用。
4、嚴(yán)格遵守從“試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本處理區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)”的單一流向制度,不得逆向進(jìn)入前一工作區(qū)。
5、非本實(shí)驗(yàn)室工作人員,未經(jīng)許可不得入內(nèi);進(jìn)修、實(shí)習(xí)或其他部門(mén)人員因科研活動(dòng)需要。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)域(試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū))需首先熟悉本程序的各項(xiàng)規(guī)定并嚴(yán)格遵守執(zhí)行,在本實(shí)驗(yàn)室人員監(jiān)督指導(dǎo)下進(jìn)行。
6、在各區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中,操作者必須戴手套、口罩、和帽子,嚴(yán)格按照操作規(guī)程。
7、試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)只能進(jìn)行試劑的貯存及配置等相關(guān)操作。
8、標(biāo)本處理區(qū)只能進(jìn)行臨床標(biāo)本的`保存,核酸提取、保存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管以及測(cè)定RNA時(shí)cDNA的合成。
9、擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)只能進(jìn)行DNA或cDNA的擴(kuò)增,實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析。
10、進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行本實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)操作規(guī)程,及時(shí)做好清潔、消毒、整理及分析統(tǒng)計(jì)等工作。
11、室內(nèi)儀器由專人負(fù)責(zé),未經(jīng)許可,不得隨意使用或挪用;愛(ài)護(hù)使用儀器,定期進(jìn)行保養(yǎng)與維修。
12、愛(ài)護(hù)實(shí)驗(yàn)室財(cái)產(chǎn),注意安全;離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)關(guān)好門(mén)窗,檢查水、電等。
XX檢驗(yàn)所
PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物的管理登記制度2
簡(jiǎn)介
Pcr實(shí)驗(yàn)室又叫基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室。PCR是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)的簡(jiǎn)稱。是一種分子生物學(xué)技術(shù),用于放大特定的DNA的片段,可看作生物體外的特殊DNA復(fù)制。通過(guò)DNA基因追蹤系統(tǒng),能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量,其精確度高達(dá)納米級(jí)別,精確檢測(cè)乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復(fù)制、是否傳染、傳染性有多強(qiáng)、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時(shí)判斷病人最適合使用哪類(lèi)抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗(yàn)依據(jù)
條件
1、必須擁有標(biāo)準(zhǔn)的的PCR熒光實(shí)驗(yàn)室;實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國(guó)Applied Biosystems公司推出由于該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍,而且與常規(guī)PCR相比,它有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn),目前已得到廣泛應(yīng)用。本文試就其定量原理、方法及參照問(wèn)題作一介紹
2、檢測(cè)設(shè)備必須符合標(biāo)準(zhǔn)PCR熒光實(shí)驗(yàn)室設(shè)置要求;熒光定量PCR儀+實(shí)時(shí)熒光定量試劑+通用電腦+自動(dòng)分析軟件,構(gòu)成PCR-DNA/RNA實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)系統(tǒng)。
3、必須通過(guò)國(guó)家臨床檢驗(yàn)中心的驗(yàn)收和認(rèn)證;
4、檢測(cè)人員必須通過(guò)國(guó)家臨檢中心業(yè)務(wù)培訓(xùn)并取得合格證書(shū); PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作人員必須參加由國(guó)家衛(wèi)生部或各省臨床檢驗(yàn)中心舉辦的臨床基因擴(kuò)增培訓(xùn)班,并持證上崗。PCR實(shí)驗(yàn)室通過(guò)驗(yàn)收,實(shí)驗(yàn)室至少必須應(yīng)有兩個(gè)以上持有“臨床基因檢測(cè)上崗證”。PCR實(shí)驗(yàn)室必須建立嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理制度、建立標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)、建立系列質(zhì)量管理文件等,確保實(shí)驗(yàn)室日常運(yùn)行符合國(guó)家衛(wèi)生部的要求,確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、確保實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生安全,確保實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期穩(wěn)定運(yùn)行
5、必須在無(wú)菌無(wú)塵環(huán)境下進(jìn)行操作
功能
能夠?qū)颊卟∏檫M(jìn)行科學(xué)、準(zhǔn)確、實(shí)時(shí)的掌控,并結(jié)合抗HBV與T細(xì)胞免疫來(lái)打破免疫耐受,阻斷肝病病毒復(fù)制的療法、有效的分解肝炎病毒,解決了乙肝病毒易變異、耐藥,病毒復(fù)制模板難以治療,人體免疫耐受狀態(tài)不易打破等醫(yī)學(xué)難題,能迅速消除臨床癥狀,而且有效抑制乙肝病毒復(fù)制,明顯加快e抗原、抗體的血清轉(zhuǎn)換速度,殺滅血液及肝細(xì)胞內(nèi)的病毒,為防止再感染提供了長(zhǎng)期保護(hù),有效阻斷和逆轉(zhuǎn)肝纖維化、肝硬化進(jìn)程。
建立方法
1、建立樣品準(zhǔn)備區(qū)
這個(gè)區(qū)域?qū)iT(mén)用作樣品的準(zhǔn)備,在制備和操作用于核酸提取的試劑時(shí)應(yīng)該采取預(yù)防措施:
⑴PCR產(chǎn)物和帶有要擴(kuò)增序列的DNA克隆不能在這個(gè)房間操作。
⑵組織培養(yǎng)物、組織標(biāo)本和血清樣品都帶進(jìn)樣品準(zhǔn)備間處理,以根據(jù)應(yīng)用的需要提取DNA或RNA。
、怯糜跇悠诽幚淼墓ぞ卟荒鼙挥米髌胀ǚ肿涌寺〉墓ぞ,也不能用作操作靶序列。
、菵NA樣品應(yīng)該用有專門(mén)的防護(hù)或正壓活塞式移液管操作,以防止在吸取樣品時(shí)有氣溶膠遺留。
、纱篌w積樣品應(yīng)該用單獨(dú)包裝的無(wú)菌一次性移液管吸取。
⑹管子打開(kāi)前都要簡(jiǎn)短離心以減少氣溶膠的產(chǎn)生,而且管子不能用力崩開(kāi),這樣會(huì)產(chǎn)生氣溶膠。
、巳魏螘r(shí)候都應(yīng)該穿實(shí)驗(yàn)服和帶手套,手套要經(jīng)常更換,尤其在抽提過(guò)程中每一步之間都要更換。實(shí)驗(yàn)服要專門(mén)用于樣品準(zhǔn)備間,經(jīng)常清洗。
2、樣品準(zhǔn)備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機(jī)會(huì)。為了避免這一問(wèn)題,反轉(zhuǎn)錄一步可以在樣品準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行。在RNA-PCR中應(yīng)用UNG以防止污染的方法也有報(bào)道。
3、建立前PCR區(qū)。
該去專門(mén)用于準(zhǔn)備各種反應(yīng),這個(gè)區(qū)域必須保持干凈,而且沒(méi)有來(lái)自克隆和樣品準(zhǔn)備的污染。前PCR區(qū)必須要有試劑和準(zhǔn)備,特別是專門(mén)用于前PCR區(qū)的正壓活塞式移液管。
4、PCR實(shí)驗(yàn)室試劑的操作。
、潘玫乃腥芤憾紤(yīng)該沒(méi)有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。
、扑蠵CR試劑中使用的水都應(yīng)該是高質(zhì)量的新鮮蒸餾的去離子水,用0.22μm過(guò)濾的,并且是高壓滅菌。
、窃20℃到25℃貯存的試劑建議加點(diǎn)像疊氮鈉一類(lèi)的抗微生物劑,在擴(kuò)增試劑或樣品制備試劑中加入0.025%的`疊氮鈉不抑制擴(kuò)增反應(yīng)。
、人迷噭┒紤(yīng)該以大體積配制,實(shí)驗(yàn)一下看試劑是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量進(jìn)行貯存。
、伤性噭┖蜆悠窚(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的瓶子和管子。
、市屡渲频脑噭┰谟糜跍(zhǔn)備新的標(biāo)本之前應(yīng)該加以檢驗(yàn)。
、藰悠窚(zhǔn)備和前PCR區(qū)所使用的移液管在不使用時(shí)都應(yīng)該小心保存。
5、在前PCR區(qū)建立PCR混合物。
、趴梢园鸭纯炭捎玫摹爸骰旌衔铩比芤号浜谩⒎盅b并保存在-20℃或4℃,在實(shí)驗(yàn)室只涉及到擴(kuò)增一種或少數(shù)幾種特異序列時(shí)這樣做很有用。
、迫绻愕膶(shí)驗(yàn)室使用多套引物,以致于配制包括所有試劑的單一反應(yīng)混合物不夠經(jīng)濟(jì),可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。
、亲鳛橐粋(gè)規(guī)則,應(yīng)該保存一套陰性、弱陽(yáng)性和強(qiáng)陽(yáng)性對(duì)照樣品來(lái)分析樣品配制和PCR前過(guò)程的效率和潔凈程度。而且,你也希望通過(guò)使用一個(gè)已知的弱陽(yáng)性樣品來(lái)驗(yàn)證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴(kuò)增抑制物。
、汝幮詷悠芬c每組樣品同時(shí)做,以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產(chǎn)物的污染,陰性對(duì)照應(yīng)該包括核酸以外的所有試劑。
、僧(dāng)做陽(yáng)性對(duì)照時(shí),有兩個(gè)理由決定了應(yīng)該使用最少數(shù)量的核酸。
、视捎诒仨氂袑(duì)照反應(yīng),對(duì)照模板的特點(diǎn)應(yīng)該予以考慮。
6、控制污染的方法。
已設(shè)計(jì)出很有力的酶學(xué)方法用來(lái)消除一種形式的污染—使用UNG,這一技術(shù)能有效地消除由PCR產(chǎn)物引起的污染。另一種控制污染的方法是使用紫外線,這種方法不能完全消除污染問(wèn)題,但可以將污染降低幾個(gè)數(shù)量級(jí)。
7、后PCR區(qū)PCR完成以后,需要分析樣品并解釋數(shù)據(jù),應(yīng)該留出一個(gè)專門(mén)用于反應(yīng)后處理樣品的地方。后PCR活動(dòng)中使用的所用試劑、一次性耗材和儀器都必須是專門(mén)用于這一目的,決不能把實(shí)驗(yàn)室這一區(qū)域的試劑或儀器用于任何前PCR活動(dòng)
PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物的管理登記制度3
PCR實(shí)驗(yàn)室廢棄物的管理登記制度
1、目的:保證實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)人員和外部環(huán)境的安全。
2、范圍:PCR實(shí)驗(yàn)室
3、職責(zé):PCR實(shí)驗(yàn)室的.工作人員負(fù)責(zé)醫(yī)療廢棄物的處理及登記
4、程序:
4、1部門(mén)職責(zé)應(yīng)對(duì)本實(shí)驗(yàn)室工作人員講明本程序在預(yù)防交叉、實(shí)驗(yàn)室污染及切斷傳播途徑中的重要性,并要求嚴(yán)格執(zhí)行。
4、2實(shí)驗(yàn)室所有垃圾,裝入專用污物袋內(nèi),各區(qū)備有:生物污染垃圾袋(黃色)。使用過(guò)的一次性消耗品(如試管、吸頭、擴(kuò)增管、等),先放入利器盒內(nèi)后,用0、55%含氯消毒液消毒后再放入黃色垃圾袋內(nèi),使用過(guò)的手套、鞋套等直接放入黃色垃圾袋內(nèi)。
4、3實(shí)驗(yàn)所用到的患者采樣管在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,應(yīng)先消毒后放入黃色垃圾袋內(nèi)。
4、4本實(shí)驗(yàn)室工作人員在工作完成后需對(duì)當(dāng)天產(chǎn)生的醫(yī)療廢棄物進(jìn)行包裝處理,并明確登記醫(yī)療廢棄物的產(chǎn)生量、時(shí)間、處理人等。通過(guò)廢棄物專用通道運(yùn)往高壓滅菌室。
4、5每天應(yīng)有專業(yè)人員對(duì)當(dāng)日產(chǎn)生的醫(yī)療廢棄物進(jìn)行高壓滅菌,并伴有化學(xué)指示卡,滅菌結(jié)束后需要進(jìn)行明確的登記。
4、6每日有院內(nèi)專門(mén)負(fù)責(zé)醫(yī)療廢棄物轉(zhuǎn)運(yùn)的人員進(jìn)行交接,交接時(shí)應(yīng)明確等登記(時(shí)間、轉(zhuǎn)運(yùn)人等)
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