探究反硝化聚磷菌在工業(yè)污水中脫氮除磷的適宜環(huán)境的論文

時(shí)間：2023-04-29 23:58:01 論文范文我要投稿

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　　一、摘要: 本課題擬從污水處理廠的缺氧段的活性污泥中取樣,分離得到反硝化聚磷菌,此菌既可脫氮又可除磷。再篩選出高效的反硝化聚磷菌菌株,進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。再將這些菌株接種到污水中,通過(guò)改變條件,探究得到適宜且高效脫氮除磷的條件,從而達(dá)到高效處理污水中氮磷元素的目的,防止水體的富營(yíng)養(yǎng)化。

探究反硝化聚磷菌在工業(yè)污水中脫氮除磷的適宜環(huán)境的論文

　　二、關(guān)鍵詞:反硝化聚磷菌脫氮除磷水體富營(yíng)養(yǎng)化

　　三、實(shí)驗(yàn)材料方法

　　1.菌株的篩選

　　(1)樣品的采集

　　本實(shí)驗(yàn)所用的活性污泥取自污水處理廠的缺氧段。

　　(2)配制篩選用培養(yǎng)基

　　反硝化菌分離培養(yǎng)基:15g瓊脂、2g硝酸鉀、0.2g七水硫酸鎂、1g磷酸一氫鉀、1g磷酸二氫鉀、5g檸檬酸鈉、1000mL蒸餾水、pH 7.2~7.5。

　　聚磷菌分離培養(yǎng)基:3.68g三水醋酸鈉、28.73mg二水磷酸一氫鈉、57.27mg氯化銨、131.82mg七水硫酸鎂、26.74mg硫酸鉀、17.2mg二水二氯化鈣、12gHEPES緩沖溶劑、15g 瓊脂、2mL微量元素、1000mL蒸餾水。微量元素構(gòu)成:50g EDTA、5g七水硫酸鐵、1.6g五水硫酸銅、5g四水二氯化錳、1.1g(NH4)6Mo7O24.4H2O、50mgH3BO3、10mg碘化鉀、50mg六水二氯化鈷。

　　(3)分離與鑒定

　　采用平板分離法分離菌株,對(duì)菌落形態(tài)進(jìn)行觀察。再對(duì)分離純化后的菌株進(jìn)行革蘭氏染色,葡萄糖氧化發(fā)酵試驗(yàn),接觸酶(過(guò)氧化氫酶),氧化酶等一系列生理生化實(shí)驗(yàn),然后進(jìn)行檢索鑒定。

　　(4) 反硝化聚磷試驗(yàn)分析方法

　　將分離出來(lái)的反硝化菌和聚磷菌富集培養(yǎng),并在20攝氏度~40攝氏度設(shè)置溫度梯度,在限磷培養(yǎng)液(PO4 <=4m g/L)中厭氧培養(yǎng)24小時(shí),然后在富含磷和硝酸根的培養(yǎng)基中厭氧培養(yǎng)20小時(shí)以上,檢測(cè)培養(yǎng)基中硝酸氮和磷的質(zhì)量濃度變化。硝酸根-N采用麝香草酚分光光度法,磷酸根-P采用鉬銻鈧比色法。

　　(4-1)麝香草酚分光光度法測(cè)定步驟:

　　(Ⅰ)繪制硝酸鹽氮校準(zhǔn)曲線

　　a.在一組7支50ml比色管中,分別加入0、0.05、0.1、0.3、0.5、0.7和1.0ml硝酸鹽氮標(biāo)準(zhǔn)溶液,加純水稀釋至1.0ml。加0.1ml氨基磺酸銨溶液,放置5min。

　　b.從管中央加入0.2ml麝香草酚溶液(勿使沿管壁流下),加2.0ml硫酸銀硫酸溶液,混勻,放置5min。

　　c.加8ml純水,混合后,加濃氨水至出現(xiàn)的黃色不再加深且氯化銀沉淀溶解為止(約9ml左右)。

　　d.在波長(zhǎng)420nm處,用光程10mm比色皿(G),以無(wú)氨水為參比,測(cè)量吸光度。

　　由測(cè)得的吸光度,減去參比水樣的吸光度后,得到校正吸光度,繪制以硝酸鹽氮含量(μg)對(duì)校正吸光度的校準(zhǔn)曲線。

　　(Ⅱ) 測(cè)定水樣

　　分別取水樣(原水1ml,出水0.1ml)加入干燥的比色管中,然后按校準(zhǔn)曲線繪制的相同步驟操作,測(cè)量吸光度。

　　(Ⅲ) 計(jì)算

　　由水樣測(cè)得的吸光度減去空白試驗(yàn)的吸光度后,從校準(zhǔn)曲線上查得硝酸鹽氮含量。

　　(4-2)鉬銻鈧比色法測(cè)定步驟:

　　(Ⅰ) 待測(cè)液的制備:稱取5.0g(精確到0.01g)通過(guò)2mm篩孔的風(fēng)干土樣于浸提瓶中。加25ml雙酸浸提液劑,振蕩5min,過(guò)濾,待測(cè)液供測(cè)有效磷用。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

　　(Ⅱ) 測(cè)定:吸取待測(cè)液2-10ml于50ml容量瓶中,加1滴2,4-二硝基酚指示劑,用2mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)到黃色,然后用0.5mol/L硫酸溶液調(diào)ph到溶液剛呈微黃色。用吸管加5ml鉬銻抗顯色劑,用水定容到標(biāo)度,搖勻。30min后,在分光光度計(jì)上用2cm光徑比色皿(如含磷量較高,應(yīng)用1cm的比色皿)、700nm波長(zhǎng)比色,以空白試驗(yàn)溶液為參比液,調(diào)吸收值到零,然后測(cè)定待測(cè)顯色液的吸收值。在工作曲線上查出顯色液的磷ppm數(shù),顏色在8h內(nèi)可保持穩(wěn)定。

　　(Ⅲ) 工作曲線的繪制:分別吸取5ppm磷的標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1、2、3、4、5、6ml于50ml容量瓶中,與測(cè)定時(shí)同樣進(jìn)行顯色,得0、0.1、0.2、0.3、 0.4、0.5、0.6ppm磷標(biāo)準(zhǔn)系列顯色液。用0ppm磷標(biāo)準(zhǔn)系列顯色液作參比,調(diào)吸收值到零,由稀到濃測(cè)標(biāo)準(zhǔn)系列顯色液的吸收值。在方格紙上以吸收值作縱坐標(biāo),磷ppm數(shù)為橫坐標(biāo)繪制工作曲線。

　　(Ⅳ) 結(jié)果計(jì)算

　　(5)篩選和繁殖

　　從中篩選高效反硝化脫氮除磷菌株,進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。

　　(6)處理污水

　　取污水處理廠的未處理過(guò)的污水,先檢測(cè)污水中氮磷的質(zhì)量濃度,以及pH。通過(guò)調(diào)節(jié)適宜的pH,再將這些菌株接種到污水中,同樣設(shè)置20攝氏度~40攝氏度的溫度梯度在上述條件中培養(yǎng),而后檢測(cè)檢測(cè)培養(yǎng)基中硝酸氮和磷的質(zhì)量濃度變化。再篩選出脫氮除磷效果相對(duì)最好的菌株,進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),再應(yīng)用到污水處理中,達(dá)到高效脫氮除磷。

　　四.結(jié)果與結(jié)果分析

　　此次試驗(yàn)通過(guò)采用硝酸根-N麝香草酚分光光度法和磷酸根-P鉬銻鈧比色法來(lái)檢測(cè)培養(yǎng)基中硝酸氮和磷的質(zhì)量濃度變化。探究得到適宜且高效脫氮除磷的條件,同時(shí)也將反硝化菌和聚磷菌有系列的結(jié)合在一起,達(dá)成一個(gè)共同生態(tài)系統(tǒng),從而達(dá)到高效處理污水中氮磷元素的目的,防止水體的富營(yíng)養(yǎng)化。

　　五.參考文獻(xiàn)

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