尋常型銀屑病并發(fā)尋常性天皰瘡2例

 銀屑病中細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、Fas、bax的檢測  

摘要 　　為了探討細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、Fas、bax在銀屑病發(fā)病中的意義，采用免疫組化ABC法、SABC法檢測了這幾種基因在15例銀屑病組織中的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)銀屑病的角質(zhì)形成細(xì)胞中抑凋亡基因bcl-2幾乎不表達(dá)，促凋亡基因Fas、bax陽性表達(dá)。提示促凋亡基因Fas、bax在銀屑病中發(fā)病起重要作用，而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。 

關(guān)鍵詞　　銀屑病、 bcl-2基因、 Fas基因、 bax基因。

　　銀屑病的發(fā)病機(jī)理尚不明確，角質(zhì)形成細(xì)胞異常增生和角化不全是銀屑病的主要病理改變，以往對這方面的研究主要集中在免疫學(xué)和生化學(xué)方面。近年來銀屑病與細(xì)胞凋亡的關(guān)系逐漸受到越來越多學(xué)者的重視。國外有學(xué)者報道銀屑病表皮中角質(zhì)形成細(xì)胞凋亡異常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是現(xiàn)今研究較多、較重要的幾個細(xì)胞凋亡相關(guān)基因。為了探討這幾種基因在銀屑病發(fā)病中的意義，我們采用免疫組化方法檢測了銀屑病中細(xì)胞凋亡相關(guān)基因bcl-2、Fas及bax。

1 材料和方法

　　1．1標(biāo)本來源：采用1994-1997年我院保存的石蠟包埋組織塊。尋常型銀屑病15例，其中男8例，女例；年齡11-68歲，平均年齡 29.13歲；均為進(jìn)行期銀屑病。6名正常人皮膚組織，皆取自皮膚外科行重瞼術(shù)、面部美容切除術(shù)者的皮膚，石蠟包埋作為對照組。測定前先將石蠟包埋組織塊作常規(guī)組織切片及HE染色，在光鏡下核對診斷，證實其病理診斷無誤方采用。

　　1．2試劑：鼠抗人bcl-2單克隆抗體購自Dako公司，生物素化羊抗鼠單克隆抗體系華美生物制品公司產(chǎn)品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及鏈酶親和素-生物素-過氧化酶復(fù)合物免疫組化試劑盒（簡稱SABC試劑盒）均購自武漢博士德生物工程公司。 　　

　　1．3方法：載玻片用APES處理后干燥備用，切取4-5μm厚的石蠟切片，常規(guī)脫蠟水化。Bcl-2基因的檢測參照ABC法稍加改進(jìn)，陽性對照為正常淋巴結(jié)，陰性對照為不加一抗。Fas、bax基因的檢測采用SABC法，陽性對照分別為武漢博士德生物工程公司提供的Fas、bax基因陽性對照片，陰性對照為不加一抗。 

　　1．4判斷：顯微鏡下觀察，棕黃色為陽性結(jié)果。陽性強(qiáng)度判斷標(biāo)準(zhǔn)如下：強(qiáng)陽性（+ + +）指50%以上細(xì)胞陽性染色；中等強(qiáng)度陽性（+ +）指25%-50%細(xì)胞陽性染色；弱陽性（+）指25%以下細(xì)胞陽性染色；陰性（-）指細(xì)胞均無任何陽性染色。

2 結(jié)果　　 6例正常人皮膚組織中：bcl-2基因除部分基底細(xì)胞呈陽性反應(yīng)外，余陰性。、Fas和bax基因為陰性表達(dá)。15例銀屑病組織中：bcl-2基因在15例表皮增生的角質(zhì)形成細(xì)胞中均呈陰性表達(dá)，但14例部分基底細(xì)胞和浸潤的淋巴細(xì)胞呈陽性染色；Fas基因在12例銀屑病組織中呈陽性表達(dá)；bax基因在13例中呈陽性

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