嗜水氣單胞菌溫敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆與檢測

根據(jù)已發(fā)表的人源嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)溫敏胞外蛋白酶基因eprA1的核甘酸序列,設計合成一對引物,以嗜水氣單胞菌魚源株Ah J-1基因組DNA為模板,通過PCR擴增得到1 005 bp的胞外蛋白酶基因eprJ1,將該基因片段連接到pMD18-T載體中,構(gòu)建克隆載體pMD-eprJ1.序列分析發(fā)現(xiàn),其與發(fā)表的Ah AH1的胞外蛋白酶eprA1基因的同源性有91%.根據(jù)測序結(jié)果在保守區(qū)重新設計一對引物以增強特異性,擴增片段大小為387 bp.對1990～2004年15年間從浙江、福建、湖北及江蘇等地不同患病水產(chǎn)動物肝腎等臟器分離到的23株Ah檢測結(jié)果顯示,從中國東南地區(qū)分離的21株Ah水生動物致病性菌株擴增均為陽性,2株Ah非致病性菌株為陰性,推測該基因普遍存在于致病性Ah中.檢測模板DNA的靈敏度可達1.5×10-3 ng/μL.

作 者： 任燕 陸承平 姚火春 REN Yan LU Cheng-ping YAO Huo-chun   作者單位： 任燕,REN Yan(中國水產(chǎn)科學研究院珠江水產(chǎn)研究所魚病中心,廣州,510380)

陸承平,姚火春,LU Cheng-ping,YAO Huo-chun(南京農(nóng)業(yè)大學,農(nóng)業(yè)部動物疫病診斷與免疫重點實驗室,江蘇,南京,210095) 

刊 名： 中國水產(chǎn)科學  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA  年，卷(期)： 2006 13(6)  分類號： S94  關鍵詞： 嗜水氣單胞菌   溫敏胞外蛋白酶基因   克隆與檢測  

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