影響豬ICSI轉(zhuǎn)基因技術(shù)效率的主要因素研究

以豬體外成熟卵子和冷凍解凍的死精子為材料,以pEGFP-N1為模式基因,探討注射臺(tái)溫度、激活后6-DMAP的處理和精子與PEGFP-N1孵育液添加BSA(牛血清白蛋白)對(duì)精子胞質(zhì)內(nèi)注射(ICSI)轉(zhuǎn)基因效率的影響.結(jié)果表明:注射臺(tái)溫度為30℃時(shí)的陽(yáng)性率為40.07%,而38.5℃時(shí)為20.97%,差異極顯著(P＜0.01).添加BSA的囊胚轉(zhuǎn)基因率為55.56%,對(duì)照組為33.33%,差異極顯著(P＜0.01).6-DMAP處理組與對(duì)照組的轉(zhuǎn)基因率分別為52.53%和26.25%,差異極顯著(P＜0.01);而且6-DMAP處理組的囊胚率(9.96%)顯著高于(P＜0.05)對(duì)照組(2.30%).研究表明注射臺(tái)溫度對(duì)轉(zhuǎn)基因效率有明顯影響,溫度高轉(zhuǎn)基因率低;精子與PEGFP-N1孵育液添加BSA對(duì)轉(zhuǎn)基因胚胎發(fā)育有一定促進(jìn)和保護(hù)作用,有利于提高囊胚轉(zhuǎn)基因率;激活后用6-DMAP處理能提高轉(zhuǎn)基因率和囊胚率.

作 者： 劉成軍 曾申明 萬(wàn)鵬程 郝澤東 LIU Cheng-jun ZENG Shen-ming WAN Peng-cheng HAO Ze-dong   作者單位： 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)動(dòng)物科技學(xué)院,北京,100094  刊 名： 中國(guó)畜牧雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF ANIMAL SCIENCE  年，卷(期)： 2006 42(17)  分類(lèi)號(hào)： S8  關(guān)鍵詞： 畜牧學(xué)   轉(zhuǎn)基因   精子胞質(zhì)內(nèi)注射   綠色熒光蛋白   豬  

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