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結(jié)核分枝桿菌融合抗原Ag85B-ESAT6真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定

時(shí)間:2023-04-26 11:28:38 生物醫(yī)學(xué)論文 我要投稿
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結(jié)核分枝桿菌融合抗原Ag85B-ESAT6真核表達(dá)載體的構(gòu)建及鑒定

以結(jié)核分枝桿菌H37Rv株的基因組作為模板,將Ag85B和ESAT6編碼基因進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后采用基因剪接重疊擴(kuò)增PCR法(gene SOEing)將其通過疏水甘氨酸接頭(GGIGIAPG)連接融合,定向克隆至質(zhì)粒Pvax1中,構(gòu)建結(jié)核分枝桿菌Ag85B-ESAT6融合抗原的真核表達(dá)質(zhì)粒Pvax1/AE.經(jīng)單雙限制性內(nèi)切酶圖譜、PCR產(chǎn)物及DNA測序分析等多種方法鑒定,證實(shí)Pvax1/AE真核表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建成功.為進(jìn)一步研究其結(jié)核核酸疫苗原型的免疫保護(hù)效果奠定了基礎(chǔ).

作 者: 程春明 曹以誠 杜正平 楊化強(qiáng) 郭旭 方翔 張珍武 CHENG Chun-ming CAO Yi-cheng DU Zheng-ping YANG Hua-qiang GUO Xu FANG Xiang ZHANG Zhen-wu   作者單位: 華南理工大學(xué),生物科學(xué)與工程學(xué)院,廣東,廣州,510640  刊 名: 河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)  ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF HENAN UNIVERSITY OF TECHNOLOGY (NATURAL SCIENCE EDITION)  年,卷(期): 2006 27(3)  分類號: Q781  關(guān)鍵詞: 結(jié)核   Ag85B   ESAT6   融合基因   核酸疫苗  

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