表達(dá)IBDV VP2融合蛋白的重組MDV的構(gòu)建及其免疫特性

將增強(qiáng)型綠色熒光蛋白基因(eGFP)與雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)的VP2基因融合,插入馬立克氏病毒(MDV)CVI988/Rispens的非必需區(qū)US10片段中,成功構(gòu)建表達(dá)VP2融合蛋白的MDV CVI988轉(zhuǎn)移載體pUC18-US10-VP2.將轉(zhuǎn)移載體質(zhì)粒與CVI988/Rispens疫苗毒共轉(zhuǎn)染雞胚成纖維細(xì)胞(CEF),篩選獲得表達(dá)VP2融合蛋白的重組MDV(rMDV).聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)和間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)(IFA)證明,rMDV傳至第31代仍能穩(wěn)定表達(dá)VP2融合蛋白.用rMDV免疫SPF雞,進(jìn)行IBDV攻毒保護(hù)試驗(yàn),1日齡SPF雞分別用1000PFU、2000PFU、5000PFU的rMDV進(jìn)行免疫,33日齡用100LD50的IBDV JS超強(qiáng)毒進(jìn)行攻毒,雞的免疫保護(hù)率分別為50%、60%、80%.值得注意的是,5000PFU的rMDV一次免疫1日齡SPF雞,其法氏囊組織病理損傷等級(jí)與IBD中等毒力活疫苗常規(guī)二次免疫相當(dāng)(2.0/1.5),其保護(hù)效果無顯著差異(p＞0.05),而與非重組病毒免疫組相比較,保護(hù)效果差異顯著(P＜0.01),這表明構(gòu)建的表達(dá)IBDV VP2融合蛋白的rMDV可以有效地為SPF雞提供免疫保護(hù)作用.

作 者： 劉紅梅 秦愛建 劉岳龍 金文杰 葉建強(qiáng) 陳鴻軍 邵紅霞 李迎曉 LIU Hong-Mei QIN Ai-Jian LIU Yue-Long JIN Wen-Jie YE Jian-Qiang CHEN Hong-Jun SHAO Hong-Xia LI Ying-Xiao   作者單位： 劉紅梅,LIU Hong-Mei(揚(yáng)州大學(xué)江蘇省動(dòng)物預(yù)防醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,揚(yáng)州,225009;安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,合肥,230036)

秦愛建,劉岳龍,金文杰,葉建強(qiáng),陳鴻軍,邵紅霞,李迎曉,QIN Ai-Jian,LIU Yue-Long,JIN Wen-Jie,YE Jian-Qiang,CHEN Hong-Jun,SHAO Hong-Xia,LI Ying-Xiao(揚(yáng)州大學(xué)江蘇省動(dòng)物預(yù)防醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,揚(yáng)州,225009) 

刊 名： 生物工程學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(3)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： CVI988/Rispens   傳染性法氏囊病病毒   重組病毒   VP2  

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