利用堿性磷酸酶融合表達(dá)技術(shù)研究神經(jīng)導(dǎo)向因子netrin-4的功能

目的:采用堿性磷酸酶(AP4)標(biāo)記技術(shù)研究netrin-4的神經(jīng)導(dǎo)向功能和受體結(jié)合特征,并評估堿性磷酸酶作為標(biāo)簽分子在真核基因功能研究中的意義.方法:將netrin-4全長及3個(gè)結(jié)構(gòu)域編碼區(qū)cDNA克隆到堿性磷酸酶表達(dá)載體APtag4,成功構(gòu)建真核表達(dá)載體AP4-netrin4、AP4-LNT、AP4-EGFL和AP4-NCT,進(jìn)而在COS7細(xì)胞中表達(dá)出含有AP標(biāo)簽的融合蛋白,并通過神經(jīng)組織塊培養(yǎng)技術(shù)和神經(jīng)元原代培養(yǎng)技術(shù)對其活性進(jìn)行鑒定.結(jié)果:確認(rèn)了netrin-4的神經(jīng)突起導(dǎo)向功能.進(jìn)一步通過對AP標(biāo)簽進(jìn)行檢測,發(fā)現(xiàn)netrin-4全長、LNT和NCT可與原代培養(yǎng)的神經(jīng)元表面相結(jié)合,而EGFL不結(jié)合,說明神經(jīng)元表面含有netrin-4受體或結(jié)合位點(diǎn),且可能通過LNT和NCT結(jié)構(gòu)域起作用.結(jié)論:netrin-4具有明確的神經(jīng)突起導(dǎo)向功能,在神經(jīng)元表面含有結(jié)合位點(diǎn),同時(shí)發(fā)現(xiàn)堿性磷酸酶標(biāo)簽融合表達(dá)技術(shù)在真核基因功能研究方面具有一定優(yōu)勢.

作 者： 秦樹桐 高艷 王利紅 周仁平 張成崗 QIN Shu-Tong GAO Yan WANG Li-Hong ZHOU Ren-Ping ZHANG Cheng-Gang   作者單位： 秦樹桐,高艷,王利紅,張成崗,QIN Shu-Tong,GAO Yan,WANG Li-Hong,ZHANG Cheng-Gang(軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所,北京,100850)

周仁平,ZHOU Ren-Ping(Department of Chemical Biology,College of Pharmacy,Rutgers University,Piscataway,NJ 08854,USA) 

刊 名： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊  ISTIC PKU 英文刊名： BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES  年，卷(期)： 2006 30(3)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 神經(jīng)導(dǎo)向因子   netrin-4   堿性磷酸酶   融合表達(dá)   基因   神經(jīng)元  

【利用堿性磷酸酶融合表達(dá)技術(shù)研究神經(jīng)導(dǎo)向因子netrin-4的功能】相關(guān)文章：

融合的作文03-27

融合的作文11-07

融合的作文03-26

堿性磷酸酶的作用是什么04-28

融合_750字05-01

融合_750字03-27

融合_800字02-18

融合_900字02-18

融合教育心得11-08

融合_800字05-01