抑制低氧誘導(dǎo)因子活性的轉(zhuǎn)錄載體pTZU6+1RNAi系統(tǒng)的構(gòu)建

目的 構(gòu)建抑制低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1a)活性的shRNA 表達(dá)載體,為進(jìn)一步探討其對(duì)HIF-1a基因表達(dá)的抑制作用.方法 設(shè)計(jì)并合成2對(duì)HIF-1a編碼基因的反向重復(fù)序列,中間分別間隔4nt和8nt,分別定向克隆至載體pTZU6+l的U6轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子下,構(gòu)建pshRNA-HIF-1al和pshRNA-HIF-1a2重組質(zhì)粒.結(jié)果 構(gòu)建的pshRNA-HIF-1al和pshRNA-HIF-1a2重組載體經(jīng)雙酶切鑒定及插入基因片段序列分析,成功地將目的基因片段插入到預(yù)計(jì)位點(diǎn), 并且與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)完全一致.結(jié)論 重組載體的成功構(gòu)建,為進(jìn)一步研究pshRNA-HIF-1a對(duì)HIF-1a活性的抑制作用和基因功能的分析、腫瘤的治療等奠定了基礎(chǔ).

作 者： 曾波 姜政 向廷秀 黃愛(ài)龍 王丕龍   作者單位： 曾波,姜政,向廷秀,王丕龍(重慶醫(yī)科大學(xué),附屬第一醫(yī)院消化科,400016)

黃愛(ài)龍(重慶醫(yī)科大學(xué),病毒性肝炎研究所,400010) 

刊 名： 重慶醫(yī)學(xué)  ISTIC PKU 英文刊名： CHONGQING MEDICINE  年，卷(期)： 2006 35(14)  分類(lèi)號(hào)： Q753  關(guān)鍵詞： pTZU6+l   shRNA   RNAi   低氧誘導(dǎo)因子   hHIF-1a  

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