牛蒡組織培養(yǎng)和高頻植株再生的研究

通過對牛蒡(Arctium lappa L.)不同外植體、不同激素配比的比較研究,建立了牛蒡離體培養(yǎng)高效植株再生體系.牛蒡子葉與下胚軸切段在含2.0 mg/L 2,4-D和0.5～2.0 mg/L BA的MS培養(yǎng)基中愈傷組織誘導(dǎo)率可以達(dá)到87%～100%;在1.0～3.0 mg/L NAA和0.5～2.0 mg/L BA的MS培養(yǎng)基上通過愈傷組織間接分化或外植體直接分化形成不定芽,其中愈傷組織分化率可達(dá)100%;下胚軸的分化率明顯高于子葉,在1.0 mg/L NAA和1.0 mg/L BA的MS培養(yǎng)基上下胚軸直接分化率達(dá)77.3%.組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)牛蒡再生有器官發(fā)生和體細(xì)胞胚發(fā)生兩種途徑.將生長狀態(tài)良好的不定芽轉(zhuǎn)至含1.0 mg/L IBA和1.0 mg/L NAA的1/2 MS培養(yǎng)基上生根,移栽,成活率達(dá)到93.3%.從誘導(dǎo)愈傷組織到組培苗在珍珠巖中過渡成活,大約需要13周.組培苗次年開花并結(jié)實(shí),生長形態(tài)特征正常.關(guān)鍵.同種植物不同器官的組織由于組成分的差異,提取RNA的方法也存在不同的難點(diǎn).在苯酚法和氯化鋰沉淀法的基礎(chǔ)上,改進(jìn)并提出了一種適合小麥葉片總RNA的快速提取方法,消除了蛋白質(zhì)、DNA、多糖、多酚等污染.該方法提取的小麥葉片總RNA,完整性好、純度高,可用于RT-PCR、Northern雜交、RACE等實(shí)驗(yàn)操作,而且簡單經(jīng)濟(jì)、快速、實(shí)驗(yàn)結(jié)果穩(wěn)定,重復(fù)性好,還適合富含多糖和脂質(zhì)的植物組織總RNA的提取.

作 者： 何雯婷 侯歲穩(wěn) 王崇英 HE Wen-ting HOU Sui-wen WANG Chong-ying   作者單位： 何雯婷,王崇英,HE Wen-ting,WANG Chong-ying(蘭州大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,蘭州,730000)

侯歲穩(wěn),HOU Sui-wen(蘭州大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,蘭州,730000;中國科學(xué)院近代物理研究所,蘭州,730000) 

刊 名： 西北植物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA  年，卷(期)： 2006 26(2)  分類號： Q813.1 Q949.783.5  關(guān)鍵詞： 牛蒡   愈傷組織   組織培養(yǎng)   器官發(fā)生   胚狀體發(fā)生途徑  

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