牛病毒性腹瀉病毒RT-LAMP檢測(cè)方法的建立

目的:建立牛病毒性腹瀉病毒(BVDv)的環(huán)介導(dǎo)體外等溫?cái)U(kuò)增(LAMP)快速檢測(cè)方法.方法:根據(jù)BVDv的5'端非編碼區(qū)序列,在保守區(qū)的8個(gè)位點(diǎn)設(shè)計(jì)LAMP特異性引物(2對(duì)特異性引物和1對(duì)環(huán)引物),對(duì)反應(yīng)條件和試劑濃度進(jìn)行優(yōu)化,建立恒溫(63.5℃)、快速(65 min)的檢測(cè)方法.結(jié)果:建立的方法特異性好,檢測(cè)其他對(duì)照病毒均為陰性;靈敏度高,最低可檢測(cè)到1個(gè)拷貝的陽性質(zhì)粒,可通過觀察渾濁度或加入染料后直接判定擴(kuò)增結(jié)果.結(jié)論:建立了用于檢測(cè)BVDv的LAMP方法,該方法簡(jiǎn)便、快速、特異性好、靈敏度高,適合基層和現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè).

作 者： 范晴 謝芝勛 劉加波 龐耀珊 鄧顯文 謝志勤 謝麗基 彭宜 FAN Qing XIE Zhi-Xun LIU Jia-Bo PANG Yao-Shan DENG Xian-Wen XIE Zhi-Qin XIE Li-Ji PENG Yi   作者單位： 廣西獸醫(yī)研究所,廣西,南寧,530001  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 牛病毒性腹瀉病毒   5'端非編碼區(qū)   環(huán)介導(dǎo)恒溫?cái)U(kuò)增  

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