甲型H1N1流感病毒核酸熒光定量RT-PCR檢測(cè)技術(shù)

目的:建立基于TaqMan熒光探針技術(shù)的甲型H1N1流感病毒實(shí)時(shí)定量RT-PCR方法.方法:分析H1N1流感病毒基因特性,根據(jù)新發(fā)甲型H1N1流感病毒突變基因片段設(shè)計(jì)檢測(cè)引物和TaqMan熒光探針,建立熒光定量RT-PCR檢測(cè)體系,體外轉(zhuǎn)錄制備RNA標(biāo)準(zhǔn)品,進(jìn)行特異性、敏感性、重復(fù)性及盲樣檢測(cè)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn).結(jié)果:可特異性有效檢測(cè)新發(fā)甲型H1N1流感病毒核酸,與H1～H16流感病毒基因無交叉反應(yīng);對(duì)RNA標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)敏感性達(dá)103拷貝/μL;重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中,陽性標(biāo)準(zhǔn)品Ct值變異系數(shù)(CV)<10%,陰性標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)結(jié)果均呈陰性;12份盲樣檢測(cè)結(jié)果特異性好.結(jié)論:該熒光定量RT-PCR方法可作為甲型H1N1流感防控的病原快速診斷技術(shù).

作 者： 尹惠瓊 劉松婷 史利軍 楊姝 章金剛 YIN Hui-Qiong LIU Song-Ting SHI Li-Jun YANG Shu ZHANG Jin-Gang   作者單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,野戰(zhàn)輸血研究所,北京,100850  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2010 21(2)  分類號(hào)： Q502 Q78  關(guān)鍵詞： 甲型H1N1流感病毒   大流行   熒光定量RT-PCR   診斷  

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