重組人胰高血糖素樣肽-1的表達及生物學活性

將人工合成的人胰高血糖素樣肽-1(human glucagon-like peptide-1,hGLP-1)基因插入質粒載體pET-32a(+)中,構建成rhGLP-1與硫氧還蛋白(thioredox)及六聚組氨酸(hexahistidine)的融合表達載體pET32-GLP-1,轉化大腸桿菌BL21(DE3)獲得表達菌株,經(jīng)IPTG誘導發(fā)酵的菌體超聲破碎后,裂解液用Ni離子親和層析純化得到融合蛋白,經(jīng)腸激酶裂解,再次Ni離子親和層析,得到rhGLP-1樣品.經(jīng)SDS-PAGE和等電聚焦檢測,樣品純度大于90%,等電點介于pH5.2～pH5.85之間.質譜測定rhGLP-1分子量為3 355.0kDa,肽圖分析得到2 097.7kDa和1 005.5kDa兩個胰蛋白酶酶解片斷,均與理論分析結果一致.動物實驗表明重組蛋白具有明顯的降血糖活性和促胰島素分泌作用.

作 者： 黃靜 徐進 左翼 徐偉東 吳自榮 HUANG Jing XU Jin ZUO Yi XU Wei-dong WU Zi-rong   作者單位： 華東師范大學生命科學學院,上海,200062  刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(1)  分類號： Q786  關鍵詞： 胰高血糖素樣肽-1   表達   生物學活性  

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