- 相關(guān)推薦
轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法對(duì)陰溝腸桿菌B8拮抗水稻白葉枯病菌相關(guān)基因片段的克隆與檢測(cè)
陰溝腸桿菌B8是從水稻葉面分離獲得的具有拮抗水稻白葉枯病菌等多種病原細(xì)菌的廣譜拮抗菌.為研究其拮抗機(jī)理,我們應(yīng)用轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法對(duì)陰溝腸桿菌B8中與抗水稻白葉枯病菌拮抗活性相關(guān)的DNA片段進(jìn)行了克隆.通過自殺性質(zhì)粒pZJ25介導(dǎo),將Tn5轉(zhuǎn)座到B8的染色體上,從而篩選到2株拮抗活性喪失的菌株B8B和B8F;用Tn5片段為探針,分別對(duì)B8、B8B、B8F進(jìn)行Southern雜交,結(jié)果在B8中無(wú)特異條帶,而在B8B和B8F中各有一條約20kb和9kb的EcoRⅠ特異條帶;分別提取二株突變菌株的基因組DNA,BamHⅠ酶切,克隆于pBS的BamHⅠ位點(diǎn)上,利用Tn5上的Kan抗性,分別篩選到質(zhì)粒pTLB和pTLF,獲得包含Tn5部分序列的B和F二個(gè)基因片段,大小約為6kb和7kb;應(yīng)用pTLB全質(zhì)粒和pTLF中約0.8kb的BamHⅠ+HpaⅠ外源F片段為探針,對(duì)B8、B8B、B8F進(jìn)行Southern雜交,證實(shí)我們克隆到Tn5轉(zhuǎn)座位點(diǎn)周圍的二個(gè)片段,且他們分別位于B8菌株染色體DNA的二個(gè)不同位置.
作 者： 黃海寧 余旭平 陳衛(wèi)良 龔鴻飛 李德葆 HUANG Hai-ning YU Xu-ping CHEN Wei-liang GONG Hong-fei LI De-bao 作者單位： 黃海寧,陳衛(wèi)良,龔鴻飛,李德葆,HUANG Hai-ning,CHEN Wei-liang,GONG Hong-fei,LI De-bao(浙江大學(xué),生物技術(shù)研究所,浙江,杭州,310029)余旭平,YU Xu-ping(浙江大學(xué),生物技術(shù)研究所,浙江,杭州,310029;浙江大學(xué),動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,浙江,杭州,310029)
刊 名： 浙江大學(xué)學(xué)報(bào)（農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版） ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES) 年，卷(期)： 2006 32(3) 分類號(hào)： Q785 關(guān)鍵詞： 陰溝腸桿菌B8 水稻白葉枯病 拮抗相關(guān)基因 克隆【轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法對(duì)陰溝腸桿菌B8拮抗水稻白葉枯病菌相關(guān)基因片段的克隆與檢測(cè)】相關(guān)文章：
水稻白葉枯病菌gacA基因的克隆、測(cè)序及敲除研究04-26
嗜肺軍團(tuán)菌lvgA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)04-26
陰溝腸桿菌分泌生物表面活性劑的合成研究04-25
陰溝腸桿菌分泌生物表面活性劑的合成研究04-25
甲醇利用菌SDM11中g(shù)lyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達(dá)04-26
葛仙米中SOD基因的克隆及在大腸桿菌中的表達(dá)04-27
枳殼CBF轉(zhuǎn)錄激活因子基因片段的克隆04-26