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蘇云金桿菌輔助蛋白P19對(duì)殺蟲晶體蛋白Cry11Aa表達(dá)的影響
蘇云金桿菌以色列亞種的p19基因、cry11Aa基因和p20基因位于同一操縱子上,據(jù)推測(cè)輔助蛋白P19可能與Cry11Aa蛋白的晶體化相關(guān).本研究利用穿梭載體pHT3101構(gòu)建了兩個(gè)重組質(zhì)粒pHcy1和pHcy3,兩質(zhì)粒均攜帶cry11Aa基因,但后者完全缺失了cry11Aa基因上游的p19基因.將重組質(zhì)粒電激轉(zhuǎn)化至蘇云金桿菌無晶體突變株4Q7中進(jìn)行蛋白表達(dá),SDS-PAGE結(jié)果表明在4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy3)中均能檢測(cè)到正常表達(dá)的Cry11Aa蛋白,但單位體積培養(yǎng)液的Cry11Aa蛋白在輔助蛋白P19存在時(shí)的表達(dá)量明顯高于其單獨(dú)表達(dá)的表達(dá)量;透射電鏡觀察顯示兩菌株中的Cry11Aa蛋白形成了大小相近、形狀相似的雙梯形晶體;另外,生物測(cè)定結(jié)果表明重組菌株4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy3)對(duì)三齡致倦庫蚊的殺蟲活性沒有顯著性差異.該現(xiàn)象說明輔助蛋白P19的缺失對(duì)Cry11Aa蛋白的晶體形成和殺蚊活性沒有影響,但P19作為分子伴侶在一定程度上幫助提高了Cry11Aa蛋白的表達(dá)水平.
作 者： 師永霞 曾少靈 袁美妗 孫釩 龐義 SHI Yong-xia ZENG Shao-ling YUAN Mei-jin SUN Fan PANG Yi 作者單位： 師永霞,SHI Yong-xia(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,有害生物控制與資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510275;南方醫(yī)科大學(xué)基因工程研究所,廣州,510515)曾少靈,ZENG Shao-ling(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,有害生物控制與資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510275;深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植中心,深圳,518010)
袁美妗,孫釩,龐義,YUAN Mei-jin,SUN Fan,PANG Yi(中山大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,有害生物控制與資源利用國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣州,510275)
刊 名： 微生物學(xué)報(bào) ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 46(3) 分類號(hào)： Q78 關(guān)鍵詞： 蘇云金桿菌 輔助蛋白P19 晶體蛋白Cry11Aa 生物測(cè)定【蘇云金桿菌輔助蛋白P19對(duì)殺蟲晶體蛋白Cry11Aa表達(dá)的影響】相關(guān)文章：
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