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雙色紅外熒光技術在蛋白磷酸化檢測中的應用
目的通過與化學發(fā)光法比較,了解雙色紅外熒光技術在目標蛋白磷酸化檢測中的優(yōu)勢.方法分別取內(nèi)毒素休克小鼠不同時間肺組織,制備組織勻漿蛋白樣品.用SDS-PAGE電泳分離后轉膜,將膜分別與磷酸化的或/和總的p42/44 MAPK抗體孵育,二抗用耦聯(lián)有Alexa Fluor 680和IRDye 800的熒光抗體或辣根過氧化物酶抗體,通過雙色紅外熒光系統(tǒng)和化學發(fā)光法進行蛋白質磷酸化檢測.結果紅外熒光檢測技術和化學發(fā)光檢測結果均顯示內(nèi)毒素處理后小鼠肺組織p42/44 MAPK磷酸化水平發(fā)生了改變,1 h最高,12 h以后逐漸恢復到接近正常水平.兩種方法檢測結果顯示了較好的一致性,相比之下雙色紅外熒光技術具有更高的靈敏度、操作方便、節(jié)省時間及可以同時檢測兩種蛋白等優(yōu)點.結論雙色紅外熒光技術在蛋白磷酸化的檢測方面具有較好的應用前景.
作 者： 劉靖華 唐靖 藍興國 劉亞偉 李志杰 陳芳 鄧鵬 姜勇 LIU Jing-hua TANG Jing LAN Xing-guo LIU Ya-wei LI Zhi-jie CHENG Fang DENG Peng JIANG Yong 作者單位： 劉靖華,唐靖,藍興國,劉亞偉,李志杰,鄧鵬,姜勇,LIU Jing-hua,TANG Jing,LAN Xing-guo,LIU Ya-wei,LI Zhi-jie,DENG Peng,JIANG Yong(南方醫(yī)科大學病理生理學教研室和廣東省功能蛋白質組重點實驗室,廣東,廣州,510515)陳芳,CHENG Fang(基因有限公司,上海,200233)
刊 名： 南方醫(yī)科大學學報 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 26(2) 分類號： Q51 關鍵詞： 蛋白質磷酸化 雙色紅外熒光 化學發(fā)光檢測【雙色紅外熒光技術在蛋白磷酸化檢測中的應用】相關文章：
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