大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞體外分離培養(yǎng)表型鑒定與標記

目的探討大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)體外分離培養(yǎng)、表型鑒定和標記的方法,為臨床進行細胞移植治療心、肝、腦等器官急性衰竭提供種子細胞.方法無菌條件下取大鼠股骨、脛骨和腓骨,用沖洗法沖出骨髓,用直接貼壁法分離純化MSCs,體外擴增,用免疫細胞化學法及流式細胞儀分別對培養(yǎng)的MSCs進行鑒定,并檢測第3代MSCs的細胞周期.結(jié)果體外培養(yǎng)的原代MSCs 72 h內(nèi)可見有少量貼壁細胞,7 d左右達到匯合.免疫細胞化學示,MSCs CD29、CD44、CD73、CD105、CD166表達陽性,而CD14、CD34、CD45表達陰性.流式細胞儀示,CD14陽性率為0.19%、CD29為64.36%、CD34為0.17%、CD44為86.73%、CD45為0.18%、CD73為90.21%、CD105為74.25%、CD166為54.60%.細胞周期顯示,第3代MSCs約有90%的細胞處于G0/G1期.結(jié)論MSCs在體外很容易分離培養(yǎng)和擴增,DAPI標記MSCs敏感性好,標記效率高,可作為標記細胞的一種有效手段,MSCs體外培養(yǎng)成功為細胞移植治療急危重癥器官衰竭提供新的治療途徑.

作 者： 何忠杰 馬俊勛 方馳華 楊麗萍   作者單位： 何忠杰,馬俊勛(南方醫(yī)科大學附屬珠江醫(yī)院普通外科,廣東,廣州,510280)

方馳華(中國人民解放軍總醫(yī)院304急救部,北京,100037)

楊麗萍(中國人民解放軍總醫(yī)院304燒傷研究所,北京,100037) 

刊 名： 中國急救醫(yī)學  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CRITICAL CARE MEDICINE  年，卷(期)： 2005 25(12)  分類號： Q503 Q813.1+1  關(guān)鍵詞： 骨髓間充質(zhì)干細胞   分離培養(yǎng)   表型   細胞周期   大鼠   流式細胞儀  

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