新型分子標(biāo)記--SRAP與TRAP及其應(yīng)用

SRAP與TRAP是最近發(fā)展的新型分子標(biāo)記系統(tǒng),具有簡(jiǎn)單、高效、高共顯性、重復(fù)性、易測(cè)序等優(yōu)點(diǎn),尤其是可檢測(cè)基因的可譯框(ORFs)區(qū)域.本文對(duì)分別在蕓薹屬作物與向日葵中開(kāi)發(fā)的SRAP、TRAP標(biāo)記系統(tǒng)的基本原理與分析程序進(jìn)行介紹.引物設(shè)計(jì)是SRAP與TRAP分析的關(guān)鍵,目前已開(kāi)發(fā)出多個(gè)SRAP正、反向引物;與SRAP標(biāo)記技術(shù)無(wú)須任何序列信息不同,TRAP技術(shù)需要基于已知cDNA 或EST序列信息設(shè)計(jì)固定引物才可進(jìn)行PCR擴(kuò)增;二者PCR條件采用復(fù)性變溫法,前5個(gè)循環(huán)復(fù)性溫度為35℃,后30～35個(gè)循環(huán)為50℃;擴(kuò)增產(chǎn)物可在聚丙烯酰胺或瓊脂糖凝膠上電泳,同位素或銀染、EB檢測(cè).目前這兩種標(biāo)記系統(tǒng)已開(kāi)始在多種作物的種質(zhì)資源鑒定評(píng)價(jià)、遺傳圖譜構(gòu)建(包括轉(zhuǎn)錄圖譜)、重要性狀標(biāo)記乃至基因分離克隆等方面成功應(yīng)用.

作 者： 柳李旺 龔義勤 黃浩 朱獻(xiàn)文   作者單位： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳與種質(zhì)創(chuàng)新國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,南京,210095  刊 名： 遺傳  ISTIC PKU 英文刊名： HEREDITAS(BEIJING)  年，卷(期)： 2004 26(5)  分類(lèi)號(hào)： Q75  關(guān)鍵詞： SRAP   TRAP   分子標(biāo)記  

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