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B72和hTERT的真核表達載體的構(gòu)建與鑒定
目的:構(gòu)建同時表達B72和hTERT的真核表達載體.方法:根據(jù)GenBank中的序列,對B72、hTERT各設(shè)計一對兩端帶特定限制性酶切位點的引物,分別從乳腺組織、乳癌組織提取總RNA,進行RT-PCR后,將2擴增產(chǎn)物分別克隆在pGEM-T載體,然后雙酶切各pGEM-T載體,回收目的片段,將2目的片段再克隆至真核表達質(zhì)粒pEGFP-C3中,并對重組體進行PCR鑒定和測序分析.結(jié)果:PCR擴增片段與預期結(jié)果相符,B72/hTERT真核表達載體構(gòu)建成功,插入片段測序結(jié)果與GenBank公布的基因一致.結(jié)論:成功構(gòu)建B72/hTERT真核表達載體.
作 者: 丁麗 趙國強 范清堂 DING Li ZHAO Guoqiang FAN Qingtang 作者單位: 丁麗,DING Li(鄭州鐵路職業(yè)技術(shù)學院醫(yī)學分院檢驗系,鄭州,450052)趙國強,ZHAO Guoqiang(鄭州大學基礎(chǔ)醫(yī)學院微生物學與免疫學教研室,鄭州,450052)
范清堂,FAN Qingtang(河南省分子醫(yī)學重點學科開放實驗室,鄭州,450052)
刊 名: 鄭州大學學報(醫(yī)學版) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES) 年,卷(期): 2006 41(3) 分類號: Q782 關(guān)鍵詞: B72 hTERT 真核表達載體【B72和hTERT的真核表達載體的構(gòu)建與鑒定】相關(guān)文章:
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