人VEGF基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究

目的:建立人血管內(nèi)皮生長因子165(hVEGF165)基因轉(zhuǎn)染大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的方法.方法:采用密度梯度離心-貼壁培養(yǎng)法獲Wistar大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs),測定其生長曲線和表面標(biāo)志CD34,CD44,CD45及SH3,檢測其向成骨細(xì)胞及脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化潛能后;用脂質(zhì)體介導(dǎo)法將pcDNA3.1-hVEGF165導(dǎo)入MSCs,觀察轉(zhuǎn)染后細(xì)胞形態(tài)和生長狀況,通過RT-PCR,Western blot和ELISA鑒定VEGF在MSCs中的表達(dá)情況.結(jié)果:大鼠MSCs經(jīng)檢測為CD44和SH3陽性,CD45和CD34陰性,可誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞;經(jīng)RT-PCR,Western和ELISA檢測證實(shí)陽離子脂質(zhì)體能成功地將hVEGF165轉(zhuǎn)染至大鼠MSCs,并獲得有效的表達(dá).結(jié)論:真核表達(dá)載體pcDNA3.1-VEGF165在MSCs中獲有效表達(dá).

作 者： 楊進(jìn)福 周文武 唐滔 胡建國 喻杰鋒 楊一峰 周新民 胡冬煦 YANG Jin-fu ZHOU Wen-wu TANG Tao HU Jian-guo YU Jie-feng YANG Yi-feng ZHOU Xin-min HU Dong-xu   作者單位： 中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院心胸外科,長沙,410011  刊 名： 中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CENTRAL SOUTH UNIVERSITY (MEDICAL SCIENCES)  年，卷(期)： 2006 31(3)  分類號： Q785 R542.22  關(guān)鍵詞： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞   分化   轉(zhuǎn)染   血管內(nèi)皮生長因子   mesenchymal stem cells   differentiation   transfection   vascular endothelial growth factor  

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