根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的百脈根遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化研究

百脈根(Lotus corniculatus L.)是世界著名的多年生優(yōu)良豆科牧草之一,也是常見的庭院觀賞植物.本文通過比較不同根癌農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化百脈根的效率和優(yōu)化百脈根子葉遺傳轉(zhuǎn)化的條件,建立了一套有效的遺傳轉(zhuǎn)化體系.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,EHA105作為宿主菌對百脈根進(jìn)行轉(zhuǎn)化較LBA4404和GV3101具有更高的轉(zhuǎn)化率;5 d苗齡的子葉最適合作為轉(zhuǎn)化的外植體;浸染過程中0.05 MPa負(fù)壓處理5 mim以及在共培養(yǎng)培養(yǎng)基中添加20 mg/L的乙酰丁香酮均可提高轉(zhuǎn)化效率.卡那霉素抗性植株經(jīng)3次選擇繼代培養(yǎng)后,PCR檢測全部為陽性.對部分PCR陽性植株進(jìn)行PCR-Southern雜交,證實(shí)PCR產(chǎn)物真實(shí)可靠,表明外源基因已整合進(jìn)入百脈根基因組中.

作 者： 孫艷香 楊紅梅 耿云紅 朱曄榮 王寧寧 王勇 Sun Yanxiang Yang Hongmei Geng Yunhong Zhu Yerong Wang Ningning Wang Yong   作者單位： 孫艷香,Sun Yanxiang(南開大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,天津,300071;河北廊坊師范學(xué)院,生物系,河北,廊坊,060051)

楊紅梅,耿云紅,朱曄榮,王寧寧,Yang Hongmei,Geng Yunhong,Zhu Yerong,Wang Ningning(南開大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,天津,300071)

王勇,Wang Yong(南開大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,天津,300071;天津市農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究中心,天津,300192) 

刊 名： 南開大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）  ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS NANKAIENSIS(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 39(2)  分類號： Q78  關(guān)鍵詞： 百脈根   根癌農(nóng)桿菌   遺傳轉(zhuǎn)化   苗齡   AS   負(fù)壓處理  

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