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人白細(xì)胞介素-4基因在家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)
采用RT-PCR法從經(jīng)LPS誘導(dǎo)刺激的人外周血淋巴細(xì)胞中克隆了人白細(xì)胞介素-4 (human interleukin-4, hIL-4) 基因.為高效表達(dá)hIL-4,促進(jìn)其臨床應(yīng)用,將hIL-4插入家蠶桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pBacPAK8中,構(gòu)建重組載體pBacPAK-hIL-4,并與線性化病毒Bm-BacPAK6 DNA共轉(zhuǎn)染家蠶BmN細(xì)胞,獲得重組病毒BacPAK-hIL-4.將重組病毒感染家蠶5齡幼蟲和蠶蛹 (1×105 PFU/頭),表達(dá)產(chǎn)物以ELISA 、SDS-PAGE和Western blotting方法檢測,用活化的人外周血T淋巴細(xì)胞測定表達(dá)產(chǎn)物體外生物活性.ELISA法結(jié)果表明hIL-4在感染病毒后96 h 的蠶血淋巴和120 h 的蠶蛹中表達(dá)量最高,分別達(dá)到2.3 μg/ mL蠶血淋巴和10.2 μg/ mL體液;SDS-PAGE、Western blotting分析表明表達(dá)產(chǎn)物分子量約20 kD;表達(dá)產(chǎn)物對活化的T淋巴細(xì)胞增殖具有明顯促進(jìn)作用.
作 者： 陳蔚青 史鋒 朱成鋼 申屠超 CHEN Wei-Qing SHI Feng ZHU Cheng-Gang SHEN Tu-Chao 作者單位： 陳蔚青,申屠超,CHEN Wei-Qing,SHEN Tu-Chao(浙江樹人大學(xué)生物與環(huán)境工程學(xué)院,杭州,310015)史鋒,朱成鋼,SHI Feng,ZHU Cheng-Gang(浙江大學(xué)生物化學(xué)研究所,杭州,310029)
刊 名： 蠶業(yè)科學(xué) ISTIC PKU 英文刊名： ACTA SERICOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 32(4) 分類號： Q78 S881.2 關(guān)鍵詞： 人白細(xì)胞介素-4基因 克隆 表達(dá) 家蠶桿狀病毒表達(dá)載體系統(tǒng)【人白細(xì)胞介素-4基因在家蠶桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)】相關(guān)文章：
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