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應用酵母雙雜交技術篩選干擾素β結合蛋白的研究
目的 應用酵母雙雜交技術篩選干擾素β(IFNβ)結合蛋白.方法 用多聚酶鏈反應(PCR)技術擴增IFNβ基因,連接酵母表達載體pGBKT7構建誘餌質粒,轉化酵母細胞AH109,與含人肝細胞cDNA文庫質粒的酵母細胞Y187進行配合,在營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基(SD/-Trp-Leu-His-Ade)和X-α-半乳糖(X-α-gal)上進行雙重篩選陽性克隆,提取酵母質粒后轉化大腸埃希菌(DH5α)并經(jīng)氨芐西林抗性篩選,提取單克隆菌落質粒,進行酶切鑒定及序列測定,并進行生物信息學分析.結果 應用酵母雙雜交技術篩選出陽性克隆29個,經(jīng)生物信息學分析,排除讀碼框架不正確者,最后得到19個克隆基因,編碼14種已知蛋白和一種未知功能蛋白.初步發(fā)現(xiàn)鐵蛋白與IFNβ具有結合作用.結論 應用酵母雙雜交技術篩選出多種與IFNβ具有結合作用的蛋白.
成軍,郭江,CHENG Jun,GUO Jiang(北京地壇醫(yī)院傳染病研究所)
郭風勁,GUO Feng-jin(重慶醫(yī)科大學細胞生物學與遺傳學教研室)
刊 名： 中華實驗和臨床病毒學雜志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF EXPERIMENTAL AND CLINICAL VIROLOGY 年，卷(期)： 2006 20(4) 分類號： Q5 關鍵詞： 酵母菌 雜交 干擾素β 結合蛋白【應用酵母雙雜交技術篩選干擾素β結合蛋白的研究】相關文章：
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