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以花藥愈傷組織為受體的水稻轉(zhuǎn)化和RNA干擾研究
在優(yōu)化花培誘導(dǎo)培養(yǎng)基成分的基礎(chǔ)上,通過延長花藥愈傷組織在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)的時間和降低共培養(yǎng)過程中農(nóng)桿菌濃度等,成功地建立了以花藥愈傷組織為受體的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系.并將白葉枯菌抗性基因Xa21作為該體系的模式基因?qū)氲蕉鄠�粳稻品種的花藥愈傷組織中,共得到了145個獨立的轉(zhuǎn)基因株系.分子檢測和田間抗性檢測發(fā)現(xiàn)其中的140個株系的基因組含有外源的Xa21基因,包括單倍體45株、二倍體87株和混倍體植株8株.根據(jù)后代性狀分離比和染色體的FISH分析可以確定,在87個二倍體植株中有15株為純合的加倍單倍體轉(zhuǎn)基因植株;再加上田間自然加倍和由秋水仙堿處理單倍體所獲得的28株加倍單倍體,共得到了43個純合的加倍單倍體轉(zhuǎn)基因株系.還將該轉(zhuǎn)化體系用于反向遺傳學(xué)的研究.一個在植物體內(nèi)能轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生雙鏈RNA(double strand RNA,dsRNA)發(fā)夾結(jié)構(gòu)的質(zhì)粒pZ2RNAi被導(dǎo)入到水稻單倍體基因組中,該dsRNA的靶目標(biāo)是水稻的OsMADS2基因的轉(zhuǎn)錄物,結(jié)果表明,在轉(zhuǎn)pZ2RNAi的單倍體水稻中,靶基因OsMADS2的表達被特異地抑制,并導(dǎo)致花器官形態(tài)的明顯改變.因此,單倍體轉(zhuǎn)化體系與RNAi技術(shù)相結(jié)合有可能成為在水稻和其他植物中功能基因組研究的一個新途徑.
夏志輝,李曉兵,翟文學(xué),程祝寬,朱立煌(中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育物學(xué)研究所,植物基因組學(xué)國家重點實驗室,北京,100101)
刊 名： 中國科學(xué)C輯 ISTIC PKU 英文刊名： SCIENCE IN CHINA (SERIES C) 年，卷(期)： 2006 36(4) 分類號： Q5 關(guān)鍵詞： 水稻 花藥培養(yǎng) 遺傳轉(zhuǎn)化 單倍體 RNA 干擾【以花藥愈傷組織為受體的水稻轉(zhuǎn)化和RNA干擾研究】相關(guān)文章：
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