SEFA-PCR法克隆靈芝鯊烯合酶基因啟動(dòng)子及其序列分析

鯊烯合酶是靈芝三萜生物合成的關(guān)鍵酶,靈芝鯊烯合酶基因的表達(dá)和活性的高低決定了靈芝中三萜含量的高低.根據(jù)已經(jīng)獲得的靈芝鯊烯合酶全長(zhǎng)cDNA序列設(shè)計(jì)一對(duì)專一引物,通過(guò)PCR擴(kuò)增得到了靈芝鯊烯合酶基因的基因組全長(zhǎng),序列長(zhǎng)1984bp,含有3個(gè)內(nèi)含子.根據(jù)其基因組序列設(shè)計(jì)引物,采用SEFA-PCR的方法,以總DNA為模板,克隆了靈芝鯊烯合酶基因的啟動(dòng)子序列,長(zhǎng)1042bp.序列分析發(fā)現(xiàn)靈芝鯊烯合酶基因啟動(dòng)子中沒(méi)有明顯的TATA和CAAT框,但是含有CCAAT-binding factor、GATA-1、GC-box、TFⅡD等重要的轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)合位點(diǎn),以及在人和釀酒酵母鯊烯合酶基因啟動(dòng)子中發(fā)現(xiàn)的甾醇調(diào)節(jié)相關(guān)的順式調(diào)控元件.

作 者： 李娜 王世明 陳軍 李玉祥 趙明文 LI Na WANG Shi-Ming CHEN Jun LI Yu-Xiang ZHAO Ming-Wen   作者單位： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)環(huán)境微生物工程重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室,南京,210095  刊 名： 菌物學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： MYCOSYSTEMA  年，卷(期)： 2006 25(4)  分類號(hào)： Q939.96  關(guān)鍵詞： 靈芝三萜   生物合成   轉(zhuǎn)錄調(diào)控  

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