蛇毒纖溶酶Alfimeprase在大腸桿菌中的可溶表達和純化

Alfimeprase是Fibrolase的突變體,是一種蛇毒纖溶酶,有纖溶活性而無出血性.根據(jù)Alfimeprase的氨基酸序列和大腸桿菌密碼子偏愛性,利用PCR的方法合成Alfimeprase DNA序列,分別融合在NusA和MBP的C端,與分子伴侶FkpA在大腸桿菌Origami B(DE3)中共表達,融合蛋白NusA/Alfimeprase以部分可溶的形式存在,可溶部分占上清總蛋白的25%左右,通過鎳柱親合層析純化和腸激酶切割得到具有纖溶活性的重組蛋白Alfimeprase.首次報道在大腸桿菌中可溶表達Alfimeprase,為以后深入研究其功能及應(yīng)用奠定了基礎(chǔ).

作 者： 張守濤 周雁勝 賴學(xué)華 包星峰 郭藹光 ZHANG Shou-tao ZHOU Yan-sheng LAI Xue-hua BAO Xing-feng GUO Ai-guang   作者單位： 西北農(nóng)林科技大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,楊凌,712100  刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q81  關(guān)鍵詞： 蛇毒纖溶酶   分子伴侶   可溶性表達   純化  

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