染料親和層析分離純化酵母兩種脫氫酶

目的 探討三嗪活性染料Cibacron Blue F3GA和KE-3B艷紅制備的親和層析柱用于建立分離純化面包酵母乙醇脫氫酶和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的方法.方法 在瓊脂糖凝膠Sepharose 6B上,分別偶聯(lián)三嗪活性染料Cibacron Blue F3GA和KE-3B艷紅,制成染料親和層析柱.將面包酵母經(jīng)超聲破碎、高速離心、硫酸銨分級(jí)沉淀、透析、冰凍干燥等步驟得到脫氫酶粗品,再經(jīng)染料親和層析柱進(jìn)一步純化.結(jié)果 經(jīng)過固定有Cibacron Blue F3GA的親和層析柱,乙醇脫氫酶的純化倍數(shù)為2.0,酶活性回收率為30.8%;經(jīng)過固定有KE-3B艷紅的親和層析柱,葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的純化倍數(shù)為23.2,酶活性回收率為66.0%.所得的乙醇脫氫酶在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳為1條帶.結(jié)論 染料配基親和層析可作為面包酵母乙醇脫氫酶和葡萄糖-6-磷酸脫氫酶的精制純化方法.

作 者： 陳翔 陳奇洲 歐國榮 馬新華 李曉麗 CHEN Xiang CHEN Qi-zhou OU Guo-rong MA Xin-hua LI Xiao-li   作者單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院衛(wèi)生學(xué)環(huán)境醫(yī)學(xué)研究所,天津,300050  刊 名： 解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF PREVENTIVE MEDICINE OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY  年，卷(期)： 2006 24(6)  分類號(hào)： Q550  關(guān)鍵詞： 染料親和層析   乙醇脫氫酶   葡萄糖-6-磷酸脫氫酶   分離純化  

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