鈣信號(hào)在ALA-PDT誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡及細(xì)胞自身保護(hù)機(jī)制中的作用

背景與目的:腫瘤的光動(dòng)力療法(photodynamic therapy,PDT)是基于光敏劑選擇性積聚在腫瘤組織中,腫瘤細(xì)胞接受可見光照后凋亡或壞死的一種治療方法.細(xì)胞內(nèi)游離鈣作為重要的第二信使參與多種細(xì)胞功能的調(diào)節(jié),但鈣信號(hào)在PDT中的作用卻不甚清楚.本研究的目的是探討鈣信號(hào)在δ氨基酮戊酸-光動(dòng)力學(xué)療法(ALA-PDT)誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡及細(xì)胞自身保護(hù)機(jī)制中的作用.方法:將SW480細(xì)胞分為4組:空白對(duì)照組、激光照射組、ALA組和ALA-PDT組.用TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡;用激光共聚焦顯微鏡觀測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的變化;放射免疫法測(cè)定各組細(xì)胞內(nèi)cAMP及cGMP含量;半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)各組細(xì)胞中鈣調(diào)素的基因表達(dá);Western蛋白印跡檢測(cè)各組細(xì)胞MEK和ERK1/2蛋白產(chǎn)物及磷酸化蛋白產(chǎn)物的表達(dá).結(jié)果:TUNEL法顯示ALA-PDT組的人結(jié)腸癌細(xì)胞在PDT后30 min凋亡指數(shù)(apoptosis index,AI)為(25.26±5.04)%,60 min AI為(50.45±7.85)%;激光共聚焦結(jié)果為ALA-PDT組細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度在10min時(shí)熒光強(qiáng)度為100.00±19.83,而20 min時(shí)達(dá)185.40±18.90(P＜0.01),而空白對(duì)照組、單獨(dú)激光照射組、ALA組細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度無明顯變化;在監(jiān)測(cè)時(shí)間內(nèi),cAMP含量在30 min時(shí)為(3.215±0.245)pmol/L,顯著高于其它各組及各組內(nèi)不同時(shí)相的cAMP含量(P＜0.001);空白對(duì)照組、激光照射組、ALA組以及ALA-PDT后30 min、60 min、90 min組的CaM3的相對(duì)表達(dá)量分別為3.97±0.29、4.28±0.39、4.51±0.44、12.60±1.84、11.39±1.13和12.77±1.35,ALA-PDT后30～90 min組的CaM3表達(dá)顯著高于空白對(duì)照組、激光照射組和ALA組(P＜0.001);ALA-PDT后SW480細(xì)胞的ERK通路激活.結(jié)論:鈣信號(hào)對(duì)ALA-PDT誘導(dǎo)SW480細(xì)胞凋亡起著重要作用,同時(shí)也誘導(dǎo)了細(xì)胞自身的保護(hù)機(jī)制--ERK通路激活.

作 者： 鄭江華 時(shí)德 趙渝 陳祖林 ZHENG Jiang-Hua SHI De ZHAO Yu CHEN Zu-Lin   作者單位： 鄭江華,時(shí)德,趙渝,ZHENG Jiang-Hua,SHI De,ZHAO Yu(重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院,血管外科/重慶市普外科學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,重慶,400037)

陳祖林,CHEN Zu-Lin(第三軍醫(yī)大學(xué)附屬新橋醫(yī)院,普外科,重慶,400016) 

刊 名： 癌癥  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CANCER  年，卷(期)： 2006 25(6)  分類號(hào)： Q27  關(guān)鍵詞： 腫瘤   ALA   PDT   SW480細(xì)胞   鈣信號(hào)   凋亡  

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