巢式-多重RT-Reahime PCR檢測馬鈴薯黑環(huán)斑病毒的研究

馬鈴薯黑環(huán)斑病毒(Potato black ringspot virus,PBRSV)是馬鈴薯重要病毒病害之一.本研究根據(jù)PBRSV基因組中RNA依賴的RNA聚合酶(RDRP)保守序列,設(shè)計(jì)合成了兩對(duì)巢式PCR引物和1條TaqMAN熒光探針,建立了巢式-多重RT-Realtime PCR檢測PBRSV的新方法.該方法采用E.Z.N.ATM珊試劑盒快速提取植物總RNA,并有機(jī)地結(jié)合了巢式PCR、多重PCR和探針檢測技術(shù).實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,該方法檢測靈敏度可達(dá)450fg/μL植物總RNA.利用4對(duì)引物和1條TaqMAN探針對(duì)PCR陽性產(chǎn)物進(jìn)行確認(rèn),本方法檢測的準(zhǔn)確性、靈敏度比巢式PCR、單重Realtime PCR等方法高.

作 者： 粟智平 耿金培 魯閩 張京萱 王穎 Su Zhiping Geng Jinpei Lu Ming Zhang Jingxuan Wan Ying   作者單位： 煙臺(tái)出入境檢驗(yàn)檢疫局,山東煙臺(tái),264000  刊 名： 檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊  英文刊名： INSPECTION AND QUARANTINE SCIENCE  年，卷(期)： 2009 19(2)  分類號(hào)： Q503 S435.32  關(guān)鍵詞： 馬鈴薯黑環(huán)斑病毒(PBRSV)   巢式-多重RT-RealtimePCR   檢測  

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