抗P185工程抗體表達(dá)與純化研究

人類的原癌基因Her-2編碼一個(gè)185kDa的跨膜受體酪氨酸激酶,也稱為p185,是腫瘤相關(guān)蛋白,在多種癌細(xì)胞,特別在乳腺癌中有高表達(dá).構(gòu)建了抗p185/HER-2的二價(jià)的嵌合抗體(scFv-Fc),并證明其保留了親本抗體的特異結(jié)合活性,進(jìn)而建立了高表達(dá)的細(xì)胞株.對(duì)該嵌合抗體進(jìn)行滾瓶大規(guī)模培養(yǎng),并對(duì)培養(yǎng)產(chǎn)物的純化條件進(jìn)行了摸索,建立了親和層析和陽離子交換層析兩步法.最終產(chǎn)物的純度在95%以上,回收率為63%.摸索了嵌合抗體的凍干保存條件,抗體可以保持其穩(wěn)定性和結(jié)合活性一年以上.嵌合抗體純化工藝和保存條件的確定,為進(jìn)一步的臨床研究奠定了基礎(chǔ).

作 者： 喬婧娟 劉海波 朱娟娟 程聯(lián)勝 劉兢 QIAO Jing-juan LIU Hai-bo ZHU Juan-juan CHENG Lian-sheng LIU Jing   作者單位： 中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,合肥,230027  刊 名： 中國(guó)生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(9)  分類號(hào)： Q81  關(guān)鍵詞： 嵌合抗體   親和純化   離子交換純化   穩(wěn)定性  

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