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小鼠體外發(fā)育卵母細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子-9基因表達(dá)
目的 體外培養(yǎng)小鼠竇前卵泡得到MⅡ期卵母細(xì)胞,比較發(fā)育過(guò)程中體外與體內(nèi)卵母細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子-9(GDF-9)的基因表達(dá)量,初步探討GDF-9的表達(dá)對(duì)卵母細(xì)胞體外發(fā)育成熟的影響.方法 出生D10雌性昆明小鼠50只,機(jī)械方法分離竇前卵泡,體外培養(yǎng)12 d.分別于體外培養(yǎng)D2、D4、D6、D8、D10、D12分離卵母細(xì)胞作為體外發(fā)育組;同窩雌性小鼠出生后D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母細(xì)胞作為體內(nèi)發(fā)育組;使用半定量逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)技術(shù)分別檢測(cè)兩組單個(gè)卵母細(xì)胞GDF-9基因表達(dá)量.應(yīng)用計(jì)算機(jī)全自動(dòng)圖像分析儀測(cè)量PCR產(chǎn)物電泳條帶的幾何平均光密度,基因表達(dá)量用相對(duì)光密度表示:檢測(cè)基因光密度/管家基因(β-actin)光密度.結(jié)果 培養(yǎng)第12天觀察306個(gè)卵泡,274個(gè)卵泡成活(89.5%),143個(gè)竇腔形成(51.8%);第13天觀察,155個(gè)卵母細(xì)胞成熟(56.6%).體外發(fā)育D2、D4、D6、D8、D10、D12卵母細(xì)胞GDF-9基因表達(dá)相對(duì)光密度分別是0.83±0.08、0.52±0.09、0.45±0.13、0.49±0.09、0.49±0.09、0.68±0.08;體內(nèi)發(fā)育D12、D14、D16、D18、D20、D22卵母細(xì)胞GDF-9基因表達(dá)相對(duì)光密度分別是0.64±0.35、0.48±0.10、0.52±0.10、0.66±0.08、0.72±0.09、0.91±0.11;體外發(fā)育D8～12卵母細(xì)胞GDF-9表達(dá)量明顯低于同期體內(nèi)發(fā)育卵母細(xì)胞(P＜0.05).結(jié)論 小鼠竇前卵泡體外培養(yǎng)后可以生長(zhǎng)發(fā)育,部分得到成熟的卵母細(xì)胞.小鼠卵母細(xì)胞GDF-9基因表達(dá)量隨發(fā)育時(shí)間的改變發(fā)生變化;體外發(fā)育D8～12卵母細(xì)胞GDF-9基因表達(dá)量低于同期體內(nèi)發(fā)育的卵母細(xì)胞可能是其發(fā)育潛能較低的原因之一.
作 者： 彭宇洪 莊廣倫 周燦權(quán) PENG Yu-hong ZHUANG Guang-lun ZHOU Can-quan 作者單位： 彭宇洪,PENG Yu-hong(廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院婦產(chǎn)科,湖北,武漢,430070)莊廣倫,周燦權(quán),ZHUANG Guang-lun,ZHOU Can-quan(中山大學(xué)附屬一院生殖中心,廣東,廣州,510080)
刊 名： 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 26(9) 分類號(hào)： Q954.43 關(guān)鍵詞： 卵母細(xì)胞 小鼠 生長(zhǎng)分化因子9 基因表達(dá)【小鼠體外發(fā)育卵母細(xì)胞生長(zhǎng)分化因子-9基因表達(dá)】相關(guān)文章：
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