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人工合成草魚(yú)生長(zhǎng)激素cDNA在大腸桿菌中的表達(dá)
經(jīng)密碼子優(yōu)化的人工合成草魚(yú)生長(zhǎng)激素cDNA與表達(dá)載體pET-28a(+)重組,構(gòu)建重組表達(dá)質(zhì)粒pET-GH。轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),篩選陽(yáng)性克隆,IPTG誘導(dǎo)表達(dá)。12.5%的SDS-PAGE分析顯示,大腸桿菌表達(dá)產(chǎn)物中含有與草魚(yú)生長(zhǎng)激素分子量一致的新增蛋白帶,激光密度掃描,其產(chǎn)量約占菌體總蛋白的40%。金屬離子螯合層析柱親和純化,獲得電泳純的重組蛋白。Western-blotting和酶聯(lián)免疫吸附受體法檢測(cè)證實(shí):重組蛋白與抗草魚(yú)生長(zhǎng)激素的多克隆抗體發(fā)生特異性結(jié)合;復(fù)性后的重組蛋白有與天然草魚(yú)生長(zhǎng)激素一致的生物學(xué)活性。
作 者: 王偉 汪亞平 朱作言 WANG Wei WANG Ya-Ping ZHU Zuo-Yan 作者單位: 中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所, 刊 名: 遺傳學(xué)報(bào) ISTIC SCI PKU 英文刊名: ACTA CENETICA SINICA 年,卷(期): 2001 28(4) 分類(lèi)號(hào): Q95 關(guān)鍵詞: 草魚(yú)生長(zhǎng)激素 原核表達(dá) 純化 酶聯(lián)免疫吸附受體檢測(cè)【人工合成草魚(yú)生長(zhǎng)激素cDNA在大腸桿菌中的表達(dá)】相關(guān)文章:
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