腺病毒載體介導(dǎo)的GFP基因在鴨胚成纖維細(xì)胞中的表達(dá)及RNA干擾

目的:建立在鴨胚成纖維細(xì)胞(DEF)中進(jìn)行RNA干擾(RNAi)的技術(shù)平臺(tái),為鴨基因組功能的研究提供新的技術(shù)手段.方法:以綠色熒光蛋白(GFP)基因?yàn)閳?bào)告基因,脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染化學(xué)合成的GFP特異小于擾RNA(GFP-siRNA),用流式細(xì)胞儀測(cè)定GFP-siRNA對(duì)重組腺病毒(Adv-GFP)介導(dǎo)的GFP基因在DEF中表達(dá)的干擾效果.結(jié)果:200 MOI(感染復(fù)數(shù))Adv-GFP介導(dǎo)的GFP基因在DEF中表達(dá)效率最高,為31.20%+3.11%,對(duì)DEF的活力無(wú)明顯影響;GFP-siRNA能有效干擾GFP基因在DEF中的表達(dá),相對(duì)抑制率為98.56%.結(jié)論:在DEF中進(jìn)行RNAi是可行的,Adv-GFP是介導(dǎo)外源基因在DEF中表達(dá)較為理想的載體;首次建立了在DEF中進(jìn)行RNAi的技術(shù)平臺(tái),為鴨基因組的功能等研究提供了新的技術(shù)手段.

作 者： 孟宇航 湯承 楊發(fā)龍 鄧書(shū) 岳華 于學(xué)輝 MENG Yu-Hang TANG Cheng YANG Fa-Long DENG Shu YUE Hun YU Xue-Hui   作者單位： 西南民族大學(xué),生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,四川,成都,610041  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分類號(hào)： Q78 R394  關(guān)鍵詞： 鴨胚成纖維細(xì)胞   RNA干擾   腺病毒載體   綠色熒光蛋白   鴨  

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