Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細(xì)胞定位及熒光共定位研究

目的:觀察腦信號(hào)蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亞細(xì)胞定位及兩者的熒光共定位情況,為明確Sema4C和GIPC在亞細(xì)胞水平的相互作用提供佐證.方法:將Sema4C的基因編碼區(qū)全長(zhǎng)、胞外段和胞內(nèi)段分別構(gòu)建到pEGFPN1和pEGFPC1表達(dá)載體中,將GIPC編碼區(qū)基因構(gòu)建到pDsRed-C1表達(dá)載體中,分別轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞,觀察亞細(xì)胞定位;將pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分別共轉(zhuǎn)染HEK293和COS7細(xì)胞,觀察兩者的熒光共定位情況.結(jié)果:酶切鑒定及測(cè)序結(jié)果表明重組載體構(gòu)建正確,Sema4C蛋白全長(zhǎng)和胞外段呈跨膜分布,而胞內(nèi)段在全細(xì)胞中呈彌散樣分布;GIPC在胞漿內(nèi)呈斑塊狀聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在熒光共定位區(qū)域.結(jié)論:Sema4C主要在胞膜和胞漿內(nèi)表達(dá).GIPC主要在胞漿內(nèi)呈斑塊樣聚集分布;Sema4C和GIPC之間存在熒光共定位.

作 者： 吳燕 吳海濤 劉淑紅 范文紅 范明 WU Yan WU Hai-Tao LIU Shu-Hong FAN Wen-Hong FAN Ming   作者單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所,北京,100850  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分類號(hào)： Q25  關(guān)鍵詞： Sema4C   腦信號(hào)蛋白   GIPC   HEK293細(xì)胞   COS7細(xì)胞   激光共聚焦顯微鏡  

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