新城疫病毒F和HN蛋白的原核表達(dá)

目的:高水平表達(dá)新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒F48E8株的F基因和HN基因.方法:利用PCR方法擴(kuò)增出新城疫病毒(Newcastle Disease Virus, NDV)標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒F48E8株的去掉N端信號(hào)肽和C端跨膜區(qū)的F基因和HN基因并將其克隆到原核表達(dá)載pET30a上,得到重組質(zhì)粒rpET30a-NDV/F和rpET30a-NDV/HN,轉(zhuǎn)化到受體菌Rosetta-gamiTM2感受態(tài)細(xì)胞中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá),SDS-PAGE電泳和Western blot檢測(cè).結(jié)果:表達(dá)的F蛋白大小約為40kD,HN蛋白大小約為51kD左右,符合預(yù)期結(jié)果.Western blot分析表明,能與抗His-tag單克隆抗體發(fā)生特異性反應(yīng).結(jié)論:重組蛋白在原核表達(dá)系統(tǒng)內(nèi)得到了高水平的表達(dá).說(shuō)明了去除F和HN基因N端信號(hào)肽和C端跨膜區(qū)的必要性.

作 者： 冉旭華 聞曉波 趙喜紅 劉長(zhǎng)鳳 RAN Xu-hua WEN Xiao-bo ZHAO Xi-hong LIU Chang-feng   作者單位： 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,黑龍江大慶,163319  刊 名： 生物技術(shù)  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 18(3)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 新城疫病毒(NDV)   F蛋白   HN蛋白   原核表達(dá)  

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