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HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及篩選有效siRNA的融合載體構建
目的:克隆HSV-1 U130 cDNA并測序,構建pEGFP-N1-Fi融合表達載體,為靶向UL30基因的siRNA的設計和篩選奠定基礎.方法:從感染HSV-1 F株的病變VERO細胞提取總RNA,二次PCR擴增出UL30 cDNA并克隆至pEGFP-N1質粒,測序鑒定序列;將UL30 cDNA 4個小片段亞克隆至pEGFP-N1形成pEGFP-N1-Fi融合表達質粒,轉染VERO細胞,熒光顯微鏡觀察融合蛋白表達情況.結果:成功克隆出UL30 cDNA,序列對比顯示與基因庫中的HSV-1 F株UL30序列同源性為99.4%;成功構建pEGFP-N1-Fi融合表達載體并實現(xiàn)Fi-EGFP融合蛋白的表達.結論:成功克隆出UL30 cDNA,成功構建pEGFP-N1-Fi融合表達載體,為靶向UL30基因的siRNA的設計和篩選奠定基礎.
作 者: 何秋璟 張春龍 仁哲 張美英 朱欽昌 劉秋英 張佩琢 王一飛 HE Qiu-jing ZHANG Chun-long REN Zhe ZHANG Mei-ying ZHU Qin-chang LIU Qiu-ying ZHANG Pei-zhuo WANG Yi-fei 作者單位: 何秋璟,HE Qiu-jing(廣東醫(yī)學院,廣東東莞,523808;暨南大學生物醫(yī)藥研究與開放基地,廣東廣州,510632)張春龍,ZHANG Chun-long(廣東醫(yī)學院衰老研究所,廣東東莞,523808;暨南大學生物醫(yī)藥研究與開放基地,廣東廣州,510632)
仁哲,張美英,劉秋英,王一飛,REN Zhe,ZHANG Mei-ying,LIU Qiu-ying,WANG Yi-fei(暨南大學生物醫(yī)藥研究與開放基地,廣東廣州,510632)
朱欽昌,ZHU Qin-chang(中科院廣州生物醫(yī)藥與健康研究所,廣東廣州,510663)
張佩琢,ZHANG Pei-zhuo(上海吉瑪制藥技術有限公司,上海,201203)
刊 名: 生物技術 PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2008 18(3) 分類號: Q782 關鍵詞: UL30基因/單純皰疹病毒1型 分子克隆 EGFP 融合表達載體【HSV-1 UL30基因cDNA的克隆及篩選有效siRNA的融合載體構建】相關文章:
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