基因重組畢赤酵母表達(dá)瑞替普酶的研究

對溶栓藥物瑞替普酶在重組畢赤酵母中的表達(dá)進(jìn)行了研究.搖瓶培養(yǎng)時,對pH、甲醇濃度和誘導(dǎo)相起始OD600 nm進(jìn)行三因子四水平L16(43)的正交實(shí)驗.結(jié)果表明,甲醇濃度的影響最顯著.表達(dá)量最高的組合為A2B4C4,生長最好的組合為A2B4C2.驗證實(shí)驗顯示,A2 B4 C4的表達(dá)量為7.72 mg/L,A2B4C2達(dá)到的干重為44.8 g/L.高密度培養(yǎng)結(jié)果表明.誘導(dǎo)相最佳甲醇濃度為4‰左右.此時,菌體各階段的平均比生長速率μ均為最大,表達(dá)量也最高,為435.6 nag/L.同時,誘導(dǎo)相pH為6.5時rPA的表達(dá)量最高,達(dá)到487.0 rag/L.研究發(fā)現(xiàn),pH為4.5和6.5時,39 ku、41 ku和60 ku的蛋白質(zhì)間存在反對應(yīng)關(guān)系,初步猜測它們之間可能存在某種修飾關(guān)系,需要進(jìn)一步研究.

作 者： 鄒敏 儲炬 ZOU Min CHU Ju   作者單位： 鄒敏,ZOU Min(南方醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,廣東,廣州510515)

儲炬,CHU Ju(華東理工大學(xué)生物反應(yīng)器工程國家重點(diǎn)實(shí)驗室,上海,200237) 

刊 名： 藥物生物技術(shù)  ISTIC 英文刊名： PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 15(3)  分類號： Q55  關(guān)鍵詞： 畢赤酵母   rPA   甲醇濃度   酸堿度  

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