牙鲆堿性磷酸酶基因5調控區(qū)的克隆及其功能檢測

通過基因組步移的方法擴增出一段924bp的牙鲆堿性磷酸酶基因5'調控區(qū)序列,在線軟件分析表明5'調控區(qū)內可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit-、RARE/TRE、AP4等轉錄因子結合位點.采用DNA重組的方法,將克隆得到的5'調控區(qū)片段插入啟動子缺失的增強型綠色熒光蛋白表達載體pEGFP-1中,構建重組表達載體pEGFP-JFALP.重組載體瞬時轉染COS-7細胞,在倒置熒光顯微鏡下可以檢測到綠色熒光信號,且熒光信號隨著時間的延長而增強.結果 表明本實驗克隆的牙鲆堿性磷酸酶基因5'調控區(qū)具有一定的啟動子活性,為今后進一步研究堿性磷酸酶基因表達調控的分子機制奠定基礎.

作 者： 施志儀 顧一峰 陳曉武 胡燕林 Shi Zhiyi Gu Yifeng Chen Xiaowu Hu Yanlin   作者單位： 上海水產大學生物技術研究中心,上海,200090  刊 名： 生物技術通報  PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2008 ""(2)  分類號： Q95  關鍵詞： 堿性磷酸酶   基因   5'調控區(qū)   克隆   功能  

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