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嗜熱厭氧乙醇菌JW200轉(zhuǎn)化條件的研究
嗜熱厭氧乙醇菌遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的缺少,制約了對該菌理論基礎(chǔ)和應(yīng)用領(lǐng)域的進一步研究.利用聚乙二醇(PEG6000)轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化技術(shù),國際上首次實現(xiàn)了嗜熱厭氧乙醇菌JW200外源基因的導(dǎo)入.PEG轉(zhuǎn)化效率很低,因此選擇對電轉(zhuǎn)化條件進行優(yōu)化,轉(zhuǎn)化效率從4±3.2個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA提高到50±7.4個轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA.實驗表明獲得較高的轉(zhuǎn)化效率的必要條件是在細胞密度為OD660 0.2時添加甘氨酸與蔗糖后,繼續(xù)培養(yǎng)2h以及細胞在電擊前的收集與洗滌保持低溫.實驗為利用基因工程手段改造嗜熱厭氧乙醇菌,從分子水平研究胞內(nèi)乙醇代謝途徑奠定了基礎(chǔ).
作 者: 彭惠 傅百靈 毛忠貴 邵蔚藍 PENG Hui FU Bai-ling MAO Zhong-gui SHAO Wei-lan 作者單位: 彭惠,毛忠貴,PENG Hui,MAO Zhong-gui(江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室,無錫,214036)傅百靈,FU Bai-ling(南京師范大學(xué)微生物工程重點實驗室,南京,210097)
邵蔚藍,SHAO Wei-lan(江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點實驗室,無錫,214036;南京師范大學(xué)微生物工程重點實驗室,南京,210097)
刊 名: 中國生物工程雜志 ISTIC PKU 英文刊名: CHINA BIOTECHNOLOGY 年,卷(期): 2006 26(11) 分類號: Q78 關(guān)鍵詞: 轉(zhuǎn)化 電轉(zhuǎn)化 條件優(yōu)化 嗜熱厭氧乙醇菌【嗜熱厭氧乙醇菌JW200轉(zhuǎn)化條件的研究】相關(guān)文章:
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