中華黃螢熒光素酶的性質(zhì)

近年來,螢火蟲熒光素酶催化的生物發(fā)光反應(yīng)被廣泛的應(yīng)用到ATP檢測、細(xì)菌數(shù)目檢測、環(huán)境監(jiān)測和其他生物學(xué)研究之中.通過對中華黃螢熒光素酶的性質(zhì)研究,發(fā)現(xiàn)其分子量為6 400左右,是一種非典型的Michaelis-Menten氏酶,對底物之一的ATP動(dòng)力學(xué)曲線為S型.最適反應(yīng)溫度為20～25 ℃,對溫度極其敏感,當(dāng)反應(yīng)溫度高于30℃時(shí),該酶的活性快速失活.該熒光素酶的最適pH=6.5.隨著pH值的下降該熒光素酶生物發(fā)光的最大發(fā)射光波長沒有明顯的紅移現(xiàn)象.Mg2+和Mn2+對該酶活性的激活效果比較接近,最佳的激活濃度均在1 mmol/L附近,而Ca2+最佳的激活濃度則小于1 mmol/L,且激活的效果只有Mg2+作用效果的50%左右.和Hg2+、Cd2+等離子一樣,Cu2+會(huì)在一定程度上抑制該熒光素酶的活性.該酶的穩(wěn)定性較差,對鹽濃度和光照比較敏感,高濃度的鹽類和長時(shí)間的日光照射能夠使酶失活.谷胱甘肽(GSH)和二硫蘇糖醇(DTT)是該酶較好的保護(hù)劑,可以提高該酶在一定時(shí)間內(nèi)的穩(wěn)定性,其中前者的作用效果要好于后者.

作 者： 胡敬志 何艷 魯心安 王菁 朱文杰 HU Jing-zhi HE Yan LU Xin-an WANG Jing ZHU Wen-jie   作者單位： 華東師范大學(xué),生命科學(xué)學(xué)院,上海,200062  刊 名： 發(fā)光學(xué)報(bào)  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF LUMINESCENCE  年，卷(期)： 2007 28(5)  分類號(hào)： O482.31 Q554  關(guān)鍵詞： 螢火蟲熒光素酶   生物發(fā)光   酶學(xué)性質(zhì)   發(fā)射光譜  

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