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甲醇利用菌SDM11中glyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達

時間:2023-04-26 06:04:38 環(huán)境保護論文 我要投稿
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甲醇利用菌SDM11中glyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達

摘要: 對甲醇降解菌Methylobacterium.sp SDM11中的glyA基因進行克隆及特性研究,以獲得更多的絲氨酸羥甲基轉移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)資源.根據(jù)GenBank中已報道的Methylobacterium extorquens AM1 中的glyA基因序列(登錄號:L33463)設計引物,以SDM11的基因組DNA為模板,PCR擴增glyA基因.利用pETblue-2載體將該基因在大腸桿菌BL21(DE3)中得到表達.PCR擴增到一個1.40 kb大小的DNA片段,經(jīng)過blast軟件比對分析,發(fā)現(xiàn)該片段與已報道的Methylobacterium extorquens AM1的glyA基因的序列相似性為95%,氨基酸序列的相似性為98%.該基因編碼468個氨基酸,預測的分子量大小為52.2 kD,等電點為7.02,發(fā)現(xiàn)純化后的目標蛋白具有SHMT酶活性,并初步測定了酶活力. 作 者: 孔慶勝    張向陽    韓曉琳    林強    董全林   作者單位: 孔慶勝,張向陽,韓曉琳(濟寧醫(yī)學院,日照,276826)

林強,董全林(華中科技大學,武漢,430071) 

期 刊: 生物技術通報  PKU   Journal: BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年,卷(期): 2010, ""(5)  分類號:   關鍵詞: SDM11    glyA基因    克隆    表達    SHMT酶   

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