醫(yī)學(xué)院藥學(xué)專業(yè)畢業(yè)論文開題報(bào)告

隨著世界人口中老年人比例和絕對(duì)數(shù)量的不斷攀升，由衰老引起的人口老化相關(guān)疾病的發(fā)病率明顯升高，與衰老相關(guān)的疾病已成為科學(xué)家面臨的一項(xiàng)重要挑戰(zhàn)。由于這類疾病常伴有嚴(yán)重的認(rèn)知障礙及精神異常癥狀，甚至癱瘓和感覺障礙[1]，嚴(yán)重危害著老年人的健康，同時(shí)也給家庭、社會(huì)帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。因此探討腦衰老機(jī)制，研究有效的延緩衰老進(jìn)程的藥物，防治老年疾病己成為當(dāng)今社會(huì)和醫(yī)藥學(xué)界研究的重大課題。

在諸多老年性疾病中，神經(jīng)退行性疾病患病率逐年提高，已經(jīng)成為影響人們健康水平和生活質(zhì)量的重大社會(huì)問題。神經(jīng)退行性疾病是中樞系統(tǒng)神經(jīng)組織非正常退變引起的一類進(jìn)行性功能缺陷與衰退疾病，如阿爾茨海默�。ɡ夏臧V呆），帕金森病，肌萎縮側(cè)索硬化癥，亨廷頓氏舞蹈癥等[2-4]。其中，老年癡呆的患病率占老年人口的4.6%，其中半數(shù)為老年原發(fā)性退行性癡呆。流行病學(xué)調(diào)查也顯示，在65歲以上的人群中，老年原發(fā)性退行性癡呆的發(fā)病率達(dá)2.9%。該病具有復(fù)雜的病理生理過程，受基因調(diào)控和多種環(huán)境因素影響，是一類病因?qū)W和發(fā)病機(jī)制還不清楚的疾病。臨床上,對(duì)于這類疾病尚無有效控制病程進(jìn)展的措施,患者最終將喪失生活能力甚至死亡。目前，我國人口老化速度居世界之首，老年人口已超過1億，因此尋求有效的預(yù)防和治療衰老疾病的藥物迫在眉睫。

我國中藥有著悠久的歷史，良好的治療效果，是中華民族傳統(tǒng)文化的燦爛瑰寶，在幾千年的實(shí)踐發(fā)展中，已形成了自己獨(dú)特的理論體系。特別是針對(duì)疑難病和慢性病，中醫(yī)藥更有它的獨(dú)到之處。中藥具有多靶點(diǎn)多效性特點(diǎn)，既可改善癥狀以治標(biāo)，又可提高機(jī)體抗病能力以治本，而且副作用較少、藥源豐富。中醫(yī)在治療老年性癡呆與記憶減退的數(shù)千年臨床經(jīng)驗(yàn)中積累了許多寶貴的知識(shí)。自20世紀(jì)80年代以來，由于化學(xué)藥品開發(fā)所存在的技術(shù)難度高、價(jià)格昂貴、毒副作用明顯和環(huán)境污染嚴(yán)重等實(shí)際問題，傳統(tǒng)中醫(yī)藥的研究受到了廣泛的關(guān)注。

地黃是常用的補(bǔ)益中藥，為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libsch的新鮮根莖或干燥塊根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，被列為上品[5]。地黃在我國有1000多年的藥用歷史，應(yīng)用十分廣泛，對(duì)免疫、血液、內(nèi)分泌、心腦血管、神經(jīng)系統(tǒng)及抗菌、抗炎等方面均有一定的作用[6]。單味地黃[7]和以地黃為主的復(fù)方在衰老及其相關(guān)疾病治療中的應(yīng)用歷史也十分久遠(yuǎn)�，F(xiàn)代藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)其主要的活性組分為環(huán)烯醚萜苷類和地黃糖類。

梓醇是地黃中含量最高的的環(huán)烯醚萜苷類，屬于環(huán)氧醚型單萜類化合物。目前本實(shí)驗(yàn)室分別在細(xì)胞和動(dòng)物水平上證明了梓醇具有神經(jīng)保護(hù)作用，可能是潛在的延緩衰老和治療神經(jīng)退行性疾病如老年癡呆、帕金森疾病的藥物。由于衰老是各種神經(jīng)退行性疾病發(fā)生的根本要素，研究梓醇的抗衰老作用對(duì)預(yù)防和治療該類疾病具有重要意義[8-9]。

實(shí)驗(yàn)前期發(fā)現(xiàn)梓醇具有改善D-半乳糖致衰老模型小鼠記憶減退的功效，同時(shí)能提高腦組織抗氧化能力和能量代謝障礙,因此本研究利用D-半乳糖引起神經(jīng)元老化的模型進(jìn)一步研究梓醇抗衰老的作用機(jī)制，為該藥的開發(fā)和臨床應(yīng)用奠定一定的基礎(chǔ)。

研究意義:

1、D-半乳糖致衰老神經(jīng)細(xì)胞模型鮮見報(bào)道，明確該模型作用機(jī)制有助于利用此模型進(jìn)行抗衰老藥物的篩選和機(jī)理研究。

2、梓醇在衰老動(dòng)物模型上的效果明顯，利用細(xì)胞模型的研究有助于闡明梓醇抗衰老作用的分子作用機(jī)制。

研究內(nèi)容:

采用小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞原代培養(yǎng),以D-半乳糖誘導(dǎo)體外神經(jīng)元細(xì)胞衰老,并通過研究藥物梓醇的加入對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的作用,進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡等綜合指標(biāo)的測(cè)定。

實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)用細(xì)胞免疫組化染色和熒光染色技術(shù)、流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡、紫外分光光度計(jì)、熒光酶標(biāo)儀等方法手段，研究梓醇在體外的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。

預(yù)期達(dá)到的成果和水平:梓醇對(duì)D-半乳糖引起的小鼠腦神經(jīng)元細(xì)胞衰老有保護(hù)作用.

因此本課題擬利用原代培養(yǎng)SD大鼠乳鼠腦皮層神經(jīng)細(xì)胞，從超微結(jié)構(gòu)、細(xì)胞周期分析及SA-β-半乳糖苷酶(Senescence associated β-galactosidase)化學(xué)染色等指標(biāo)觀察D－半乳糖培養(yǎng)對(duì)神經(jīng)元擬老化反應(yīng)并從生化方面研究梓醇的抗老化作用。

研究重點(diǎn)難點(diǎn):

1、掌握原代神經(jīng)元細(xì)胞的培養(yǎng)、免疫組織化學(xué)等實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

2、明確D-半乳糖致神經(jīng)元衰老的作用濃度和作用時(shí)間范圍。

3、初步研究D-半乳糖致神經(jīng)元衰老的作用機(jī)理。

4、明確梓醇對(duì)D-半乳糖致衰老神經(jīng)元的作用效果。

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