索氏提取法提取藍莓原花青素優(yōu)化條件的初探
摘要:采用索氏提取法研究各種不同條件對藍莓原花青素提取率的影響,運用紫外分光光度法進行測定,通過單因素試驗分析藍莓原花青素的最佳提取條件:乙醇體積濃度約 60%,溫度90℃,pH為 4,料液比為1g:10ml,提取5h為最佳提取條件。
關鍵詞:藍莓 原花青素 索氏提取法 紫外分光光度法
一、引言
原花青素(proanthocyanidin.PC)又稱原花色素,作為一種天然食用色素,安全、無毒、資源豐富,而且具有一定營養(yǎng)和藥理作用,在食品、化妝、醫(yī)藥等方面有著巨大的應用潛力。花青素廣泛存在于橡樹、七葉樹、榛木、山楂、蘋果、漿果、大麥、豆莢、大黃、高粱和薔薇果等高等植物的器官組織中,藍莓中也含有原花青素且藍莓果實含有的原花青素是所有的水果與蔬菜之中含量最多。藍莓果實營養(yǎng)豐富,除含有常規(guī)的糖、酸、VC。礦物元素外,還含有尼克酸、黃酮等特殊成分。對藍莓資源進行合理利用,對提高產(chǎn)品附加值具有重大意義,通過索氏提取法單因素試驗分析優(yōu)化條件,希望為藍莓原花青素的開發(fā)和應用提供一定的.理論基礎。
二、試驗部分
1.實驗儀器:索氏提取器、研缽、分光光度計、PH計。
2.實驗藥品:鹽酸分析純、乙醇分析純、醋酸鈉。
3.實驗方法:取約5.00g藍莓漿,用索氏提取儀提取,0.1mol/l在鹽酸乙醇溶液(8.3ml濃鹽酸用95%乙醇稀釋成1L)浸提5h后,以0.1 mol·L-1的鹽酸乙醇溶液做參比液,在分光光度計測定提取液在530nm波長下的吸光度。
三、結果與討論
1、實驗結果
①乙醇體積濃度對提取率的影響(見圖1)
稱取4份樣品,每份5.00g,分別取50ml體積濃度40%、60%、80%、100%鹽酸乙醇溶液,用索式提取法在90℃提取5h,過濾,以0.1 mol·L-1的鹽酸乙醇溶液做參比液,在分光光度計測定提取液在530nm波長下的吸光度值
結果表明,原花青素的提取率先隨提取劑濃度增大而增加,但產(chǎn)生峰值后開始降低。在50%到70%之間出現(xiàn)峰值,處于較高的吸光度值。當乙醇體積濃度大于60%以后,原花青素提取率開始下降。這可能是由于溶劑的極性變化所致,原花青素的溶出率與溶劑極性有關,極性相似可達到最大溶出率。
②溫度對提取率的影響(見圖2)
稱取4份樣品,每份5.00g,取體積濃度60%鹽酸乙醇做溶劑,料液比為 1g:10ml,分別在30℃、50℃、70℃、90℃下進行提取5h 過濾。以0.1 mol·L-1的鹽酸乙醇溶液做參比液,在分光光度計測定提取液在530nm波長下的吸光度值。
結果表明,原花青素提取率隨溫度升高表現(xiàn)出逐漸增加的變化趨勢,但是過高溫容易造成原花青素不穩(wěn)定,可能產(chǎn)生部分分解。90℃為宜。
③料液比對提取率的影響(見圖3)
稱取4份樣品,每份5.00g,分別取50ml體積濃度為60%鹽酸乙醇溶液,90℃水浴條件下,分別以料液比1g:10ml、1g:15ml、1g:20ml、1g:25ml浸提5h過濾,以0.1 mol·L-1的鹽酸乙醇溶液做參比液,在分光光度計測定提取液在530nm波長下的吸光度值。
結果表明,提取劑用量越大提取效果越好,但是用量大到一定程度提取率急劇降低,料液比為1g∶10 mL 效果最好。
④pH 值對提取率的影響(見圖4)
稱取4份樣品,每份5.00g,取鹽酸乙醇體積濃度為60%,分別調(diào)節(jié)PH為4、5、6、7,90℃水浴條件下,料液比1g:10ml 浸提5h過濾,以0.1 mol·L-1的鹽酸乙醇溶液做參比液,在分光光度計測定提取液在530nm波長下的吸光度值。
結果表明,不斷增加體系的pH 值,提取率呈現(xiàn)不規(guī)則變化,在pH4~5 范圍內(nèi)提取率變化不明顯,在pH在6~7范圍內(nèi)明顯降低。
⑤提取時間對提取率的影響(見圖5)
稱取4份樣品,每份5.00g,乙醇體積濃度為60%,分別調(diào)節(jié)PH為4、5、6、7,90℃水浴條件下,料液比1g:10ml 浸提5h過濾,以0.1 mol·L-1的鹽酸乙醇溶液做參比液,在分光光度計測定提取液在530nm波長下的吸光度值。
結果表明,隨著提取時間的延長,提取率有所增加但變化緩慢4h-5h 時提取率最高。
四、結論
索氏提取法提取藍莓原花青素的最佳提取條件為:乙醇體積濃度60%、溫度為90℃、pH 為4、料液比為1g∶10 mL、提取時間5h。
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