常用生理鹽水的配制
常用生理鹽溶液的配制
常用生理鹽溶液的配制 :
進行在體或離體器官及組織實驗時,應盡可能使標本處于近似在體內(nèi)的環(huán)境以保證其正常的生命及其功能活動。其需要具備以下條件:(1)滲透壓與組織液相同;(2)有維持組織器官正常機能所必需的比例適宜的各種離子;(3)酸堿度與血漿相同并具有緩沖能力;(4)營養(yǎng)物質、氧及溫度與組織液相同。這類液體稱為生理鹽溶液。
一、常用生理鹽溶液的配制
動物種類不同其代替液的組成各異,滲透壓也不一樣,因此,作為代替液的生理鹽溶液在組成成分上也有所區(qū)別。如:兩棲類動物體液的滲透壓相當于0.65%NaCI溶液;溫血動物體液的滲透壓則相當于0.9%NaCI溶液;海生動物體液的滲透壓約相當于3%NaCI溶液。
不同動物的組織器官對氧和營養(yǎng)物質等內(nèi)環(huán)境成分的需求有一定差異。兩棲類動物組織器官對氧和營養(yǎng)物質需要程度低于溫血動物。各種實驗的目的不同生理鹽溶液的組成成分可作種種變動。常用的有:生理鹽水、任氏液、樂氏液、臺氏液等。
(一) 常用生理鹽溶液及其成分
(二)利用原液配制生理鹽溶液
二、常用生理鹽溶液的用途
一般實驗中常用的鹽溶液有生理鹽水即與血清等滲氯化鈉溶液,在冷血動物應用0.6%~0.65%,哺乳動物應用0.85%~0.9%。任氏液(Ringer)主要用于蛙心灌注及其他冷血動物實驗;樂氏液(Locke)用于哺乳類動物心臟、子宮及其離體臟器實驗,灌注時須于用前通入氧氣15min。低鈣樂氏液(含無水CaCl20.05g)用于離體小腸及豚鼠的離體支氣管灌注。臺氏液(Tyrode)用于哺乳動物離體小腸實驗。
近年來對組織提取和細胞培養(yǎng)常需用胰蛋白酶(trypsin)或EDTA(ethylene diamine tetraacetic acid, Versene)對組織或細胞進行處理。Ca2+或Mg2+對
此有妨礙作用,故在此情況,常用不含Ca2+及Mg2+的生理鹽溶液。用胰蛋白酶處理的.組織或細胞,常用溶液作為營養(yǎng)液。Moscona溶液成分為:
NaCl
KCl
8.00 g 0.20 g 0.005 g NaH2PO4 NaHCO3 Glucose 1.00 g 2.00 g
加蒸餾水到 1000 ml
需用處理的組織或細胞,所用營養(yǎng)的成分則為:
Na-Versenate
NaCl
KCl 0.2 g 8.0 g 0.2 g
1.15 g Na2HPO4
KH2PO4
Glucose 0.2 g 0.2 g
加蒸餾水到 1000 ml
三、生理鹽溶液配制注意事項
配制生理鹽溶液時要注意各種離子的相互作用。一般應在實驗前配制,并不宜放置過久,以免發(fā)生污染或某些成分發(fā)生化學變化而影響實驗結果,或者先將溶液的各種成分分別配制成一定濃度的基礎溶液備用,用時按比例取基礎液配制。在配制各種生理鹽溶液時應注意以下幾點:
1. 因生理鹽溶液中的磷酸根和碳酸根負離子常用生理鹽水的配制易與鈣離子發(fā)生反應,生成不溶性的白色磷酸鈣或碳酸鈣沉淀。所以,在配制生理鹽溶液時,先將其他離子原液混合并加入蒸餾水,最后再將溶解的氯化鈣溶液一邊攪拌一邊緩緩加入,以防鈣鹽沉淀生成。
2. 葡萄糖應在臨用時加入,加入葡萄糖的生理鹽溶液不能久置,以免發(fā)生細菌污染出現(xiàn)混濁。
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