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淀粉水解糖的制備
一實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
(1)通過實(shí)驗(yàn),了解淀粉糊化及酶法制備淀粉糖漿的基本原理;
(2)掌握淀粉酶解法制備淀粉糖漿的實(shí)驗(yàn)方法,
(3)熟悉淀粉水解產(chǎn)品的葡萄糖值測定方法。
一 實(shí)驗(yàn)原理
發(fā)酵生產(chǎn)中,部分產(chǎn)生菌不能直接利用淀粉。也基本上不能利用糊精作為碳源。因此,當(dāng)?shù)矸圩鳛樵蠒r(shí),必須現(xiàn)將淀粉水解成葡萄糖才能共發(fā)酵使用。在工業(yè)上將水解淀粉為葡萄糖的過程稱為淀粉的“糖化”?捎脕碇苽涞矸鬯馓堑脑虾芏,主要有山芋,玉米,小麥,等含淀粉的原料。水解淀粉為葡萄糖的方法有三種,即酸解法,酶解法,酶酸法及雙酶法。本實(shí)驗(yàn)采用的是雙酶法將淀粉水解成葡萄糖。首先利用的是α-淀粉酶將淀粉液化,轉(zhuǎn)化為糊精及低聚糖,使淀粉可溶性增加;接著利用糖化酶將糊精及低聚糖進(jìn)一步水解,轉(zhuǎn)化為葡萄糖。
二 實(shí)驗(yàn)器材
1,實(shí)驗(yàn)材料
玉米粉 α—淀粉酶(2000u/g) 糖化酶(50000 u/g) 碘液(11g碘加22gkl,用蒸餾水定容至500ml)
2,儀器設(shè)備
恒溫水浴槽 真空泵 抽濾紙及布氏漏斗 比色卡、
四實(shí)驗(yàn)方法:
淀粉在常溫下不溶于水,但當(dāng)水溫至53℃以上時(shí),淀粉的物理性能發(fā)生明顯變化。淀粉在高溫下溶脹、分裂形成均勻糊狀溶液的特性,稱為淀粉的糊化
淀粉糊化溫度必須達(dá)到一定程度,不同淀粉的糊化溫度不一樣,同一種淀粉,顆粒大小不一樣,糊化溫度也不一樣,顆粒大的先糊化,顆粒小的后糊化。
取50克淀粉置于400毫升燒杯中,加水200毫升,攪拌均勻,配成淀粉漿,用5% Na2CO3調(diào)節(jié)pH=6.2—6.3,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加熱,并不斷攪拌,淀粉漿由開始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克,不斷攪拌使其液化,并使溫度保持在70℃。然后將燒杯移至電爐加熱到95℃至沸,滅活10分鐘。過濾,濾液冷卻到55℃,加入糖化酶1克,調(diào)節(jié)pH=4.5,于60-
大學(xué)網(wǎng) 65℃恒溫水浴中糖化3-4小時(shí),即為淀粉糖漿,若要濃漿,可進(jìn)一步濃縮。三 操作步驟
50克淀粉置于400毫升燒杯中,加水100毫升,攪拌均勻,配成淀粉漿,用5% Na2CO3調(diào)節(jié)pH=6.2—6.3,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加熱,并不斷攪拌,淀粉漿由開始糊化直至完全成糊。加入液化型α---淀粉酶1克,不斷攪拌使其液化,并使溫度保持在70℃。然后將燒杯移至電爐加熱到95℃至沸,
滅活10分鐘。過濾,濾液冷卻到55℃,加入糖化酶1克,調(diào)節(jié)pH=4.5,于60-65℃恒溫水浴中糖化3-4小時(shí),即為淀粉糖漿,若要濃漿,可進(jìn)一步濃縮。
1,液化:稱取50g玉米粉與燒杯中,加水至100ml,用純堿調(diào)節(jié)PH到6.2-6.4,再加入適量的氯化鈣。使鈣離子濃度達(dá)到0.01mol╱L,并加入一定量的α-淀粉酶(控制5-8u╱g淀粉) ,攪拌均勻后加熱至65℃,保溫1.5h’左右,用碘液檢驗(yàn),達(dá)到所需的液化程度后升溫到100℃,滅菌5-10min
2,碘液檢驗(yàn)的方法:在潔凈的比色卡上滴入1-2滴碘液,再滴待檢的液化液,若反應(yīng)液呈橙黃色或棕紅色即液化完全。
3,糖化:將上述的液化液冷卻至60℃,用10%檸檬酸調(diào)解PH至4.0-4.5按100u/g淀粉的量加入糖化酶,并于55-60%保溫糖化至糖化完全。糖化結(jié)束后升溫至100℃,滅酶5min。
4,糖化終點(diǎn)的判斷:在150×15試管中加入10-15ml無水乙醇,加糖化液1-2滴,搖勻后若無白色沉淀形成表明已達(dá)到糖化終點(diǎn)。 5,過濾:將糖化液趁熱用布氏漏斗進(jìn)行抽濾即為水解糖液。
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